腹部肠管火器伤后肝组织cox2的表达与内毒素血症的关系

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1、腹部肠管火器伤后肝组织COX2的表达与内毒素血症的关系：刘江伟，吕月涛，薛会朝，张永久，冯德元，许永华，李建英【摘要】目的探讨环氧化酶2（COX2）在腹部肠管火器伤后肝组织中表达的变化及其与肠源性内毒素血症的关系。方法健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12、24小时组，实验组建立腹部火器伤肠管穿透模型后，用显色基质鲎试剂法检测各组血浆内毒素水平；免疫组化图像分析法测定各组肝组织COX2的表达，同时测定血清中谷丙转氨酶（ALT）水平。结果伤后各组血浆内毒素水平、肝组织COX2的表达及血清ALT水平均明显高于对照组（P＜0.05）。血浆内毒素水平于伤后8小时出现高

2、峰，伤后12小时仍维持在高峰值水平；肝组织COX2的表达及血清ALT水平均于伤后2小时和12小时出现2个高峰。相关分析表明，伤后肝组织COX2与血浆内毒素及血清ALT水平均呈正相关（r值分别为0.718、0.850，P<0.05）。结论腹部肠管火器伤后COX2的表达与内毒素血症密切相关，COX2在腹部肠管火器伤继发性肝损伤中可能起重要作用。【关键词】环氧化酶2；内毒素；腹部损伤；火器伤；肝损伤　　Abstract:ObjectiveToinvestigatethechangesofexpressionsofhepaticCOX2andtherelationshipbetia

3、afterintestinalfirearmizedinto7groups:controlgroupandodelsofintestinalfirearmaendotoxineasuredbyusingchromogeniclimulusamebocytelysatetest;HepaticCOX2expressioneasuredmunohistochemicalstainingandimageanalysisinallgroups.LevelsofserumALTined.ResultsLevelsofplasmaendotoxin,hepaticCOX2expressions,se

4、rumALTinaendotoxinreachedthepeakin8hgroup,anditALTappearedtaendotoxinandserumALT(r=0.718and0.850,P<0.05).ConclusionAfterintestinalfirearmatelycorrelatedia,COX2mayplayanimportantroleinsubsequentliverinjuryafterthefirearminalinjuries;firearmg/kg+0.05%硫酸阿托品注射液0.04mg/kg对猪耳后肌肉注射麻醉后，将猪行走位悬吊于戈壁军用靶场门廊上

5、，四肢自然下垂，完全暴露腹部，于脐水平后方2cm处右侧腹壁皱襞下缘无毛区标记射击点。采用军用54式手枪，7.62mm手枪弹，经专业机构校准：子弹出膛初速度430～435m/s，弹丸重量5.5g，撞击能量508.48～520.37J，专业射手用手枪距猪侧腹壁30cm处瞄准射击点，从右侧腹壁垂直射入，左侧对应位置射出弹头。伤后15分钟内运回动物实验室，常温及动物实验室环境：温度22～24℃，相对湿度50%～60%。对照组除不致伤外，其余步骤与致伤组相同。　　3标本采集　　实验各组分别于伤后1、2、4、8、12、24小时各时间点用无热原注射器抽取猪耳缘静脉血，对照组回实验室后立即抽血，一部分置入无

6、热原肝素抗凝试管，离心提取血浆，置入无热原试管-80℃保存用于内毒素检测，一部分置入肝生化负压储血管，用于ALT检测。对照组抽血后立即开腹，实验组回实验室后于相应时间点抽血后麻醉开腹，每组动物均取肝左中叶下段肝组织，10%中性甲醛固定。　　4免疫组化图像分析法检测COX2的表达　　COX2抗体为福州迈新公司产品（工作浓度1：100），按SABC法免疫组化试剂盒说明书操作。0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。用ImageproPlus5.0医学图像分析软件检测每组细胞阳性染色的累积光密度值，用来表示COX2表达相对量。每张切片随机选取5个不重叠的高倍镜视野分析，分析过程

7、中所有切片的放大倍数（×400）光源强度均相同。　　5肝脏血清酶学测定　　取血静置30分钟后离心，东芝全自动生化分析仪(TBA40FR)测血清ALT水平。　　6血浆内毒素测定　　显色基质鲎试剂试管法测定内毒素含量，操作按说明书进行。所用试剂为厦门鲎试剂厂产品。　　7统计学处理　　实验数据以±s表示，用SPSS13.0行单因素方差分析，LSDt检验进行两两比较，两变量相关分析用Pearson直线相关分析，检