欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:36567162
大小:4.46 MB
页数:65页
时间:2019-05-12
《诱导胚胎和骨髓间质干细胞分化为眼表上皮细胞用于眼表重建的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中山大学博士学位论文诱导胚胎和骨髓间质干细胞分化为眼表上皮细胞用于眼表重建的研究姓名:黄丹平申请学位级别:博士专业:眼科学指导教师:葛坚2003.5.6墼篓整主鲎塞翌塑整鍪夔燕。。。诱导胚胎和骨髓闻矮子细胞分能为眼表上皮细胞用于眼表重建的研究临藤嚣学博士研究垒黄静乎+穗等老晦蔫坚教筱审灰太喾中蠢眼辩中心摘要睡懿研党镩筛鞠髂内诱簿零陵骶骆予缨魅(embryonicsterncell,ESC)罄入骨髓翔兖瑷手缨憋(mesenchymalstemcell,MSC)分纯为缎貘上瘦缀藏貔W裁憋及聚静,巍产鬟鼹液痰瘸戆潼疗提镞
2、鳜拣途径,灸糨建缀缎王糕健缝膜疆镞薪燮豹摊子缀熬葵怒萋懿。f磐法1.采弼A辩受络黢士凌缨溅襻为诱警条羚,采爝势豢熬培器豹方竣诱馨小裁ESC辩天MSC,糯鬟襁菠羲微镜鼹察共臻莽藤形态豹改燮;兔痰筑绞纯孥法羧测诱警嚣魏缨貔角滠巍3/12(CK3/CKl轴、角骚自13(CKl3)、湘c4和赫{JCSAC鹃表达;2。褥表遮绿魏荧光螯鑫舱小鬣鹚c(ES-t;FP)鞠入黼e分粼接释烈僳赛太苹器≤土焚培券4天,耀5-漠脱鬣藤赎啶(BrdU)标记蘑移撩到兔跟表缭骥缺损麓,掺穗蓐l,2,3,4,8鹣8鼹,糖取各维蜜黢袋褥焚毙髓镦镜、
3、缀缀瘸璞攀秘免疫缀爨纯学梭鸯,荧必梭测醛喝盼缨怨在缎缀巾豹荧毙表达,缀织痣攥学梭套移骥戮凝表游ES-GFP臻黪耧MSC熟存滔、黪态变德狱毅骖疆蜀簿鹣爱藤等僚撬;凳疫缀绞纯攀猃溺移錾蘩羧袭熬鬻骞BrdU椽记熬ES-GFP矮熬辍Msc翱【3愆默2帮CKl3辩袭遮,魄羧两静予维熬在肇黢移溅表徽环境诱譬下翡毋纯情况戮及等l憋豹精帮葳旋德弑。3。将久瞒e接静在僚静入攀膜童壤棼《天,惩鼢dU标识嚣移撩翊酸翱:凳貘缘和凳壤上发拘熊歉角膜上,穆植磁l,2,3,4,6秘8瘸。行缀缎瘫理攀释免痰缀织纯攀捻查,蕊豢gSC的存潘、形态燮能
4、以及蓼穗爨郏的爱墩等愤况;检测MSCCK3/CKl2秘CKl3的表达。缝榘l,※旗人帮热缝袋上友缒瞧撵努瀵譬燕羚,ESC凌诱导?2套酵鹾爵楚帮势耀熬显承受黧上蔽榉鬃熬形卷,缀13、M£瓣毒表遮鬻瞧,CK3/CKl2、MUC5AC表达弱憋;——夔墨王鳢点堡塞鼹塑蔓爨墼塑MSc在诱导14天后有部分细施驻示典激上皮样细胞形态,CKl3、MUc4表达辩性,eK3愆夏12、MUC5Ac表达骥牲;2.ESC秘M$C分别接秘到羊默嚣均能狂羊膜上生长,与羊膜共熔养4必后ESC分化为多角形细胞,而MSC贴附羊膜鼙长逐速,缨藏澎态无骥
5、霞莰交。3.耀羊膜受载ES.G转缨魏和MSC移楼裂受结膜缺损隧,术厝组织学棱查羊膜植片程术后2周溶解,术后4周结膜缺损区己愈合,荧淹嚣徽镜可在蘩膜主痰鼷梭瓣要《绿色荧毙繁,免疫组织他学梭溅嚣蕴懿缡麒上皮屡均可检测到BrdU核阳性细胞。4.用苇膜负载MSC穆植到兔角膜基旗,术詹缀织掌检查术蠢2雳角膜上皮愈合,角膜轻度游涟,在角膜上皮及浅蒸震按可捡测到BrdU垓鞭性细貔。5.羊臌灸载MSC组引起豹局郯反应比攀膜负、,,栽ES.GFP细胞组轻,两组均来见瘤性增殖。r帮论1.采用分艨共培养的方法。,鼹缝簇上菠缨熬佟诱导裁霹
6、瑷诱导夸羲坯骆于缎蘧彝入骨麓翔矮子缨骢趣缕骥上皮样细胞分化。2.保存人羊膜能诱导ESC分化为上皮样细胞,不能诱导MSc分健舞上皮缨藏。羊蒺蜀挺进又骨髓阗藤予缨巍生长,哥俸兔蚤鼹鬻覆手维藏瓣载体。3.柴用人苹膜负载小鼠胚胎干细胞和人骨髓间质千细胞进杼结膜熏建,胚胳千缀臆帮秀髓溺爱子觏藏能在缩貘萋矮存活势分像秀结貘主交撵蘩穗,霄鎏受暇衰疾瘸的治疗提供一种新的途径。4.采用人翠膜负载入骨髓阃质于细胞进行角膜重建,骨髓阀质干编耱能在角膜基艨存活并分纯受精貘土交样缅臆。5。果鲻摹骥受鼗,j、鼠燧齄于纲腿和九露髓闻矮于细魏避行
7、结膜重建,嚣髓闽腰:F细胞引起的炎症反应眈胚胎千细胞轻,具有比胚胎千蹦胞更好的临床应用前絷。荚键溺疑齄予麴稳嚣懿鳎凄予缨瘫骥上受缎骢翼戛表黄丹平博士论文导师葛坚教授ThestudyoninducedcommitteddifferentiationofembryonicstemcellsandmesenchymalstemcellsintoconjunctivalepithelialcellsandtheirapplicationinocularsurfacereconstructionM.DCandidate:Da
8、npingHuangSuperviSOT:ProfessotJianGeZhongshanOphthalmiccenter,ZhongshanUniversityABSTRACTobjeetiveToinvestigatetheprobabilitiesofinducedcommitteddifferentiationofmurineembryonicste
此文档下载收益归作者所有