脊神经结扎诱导神经病理痛大鼠脊髓背角

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1、·162·中国疼痛医学杂志ChineseJouma】0fPainMedicine2009。15，(3脊神经结扎诱导神经病理痛大鼠脊髓背角BDNF的含量和表达上调廖斐斐耿山景刘小旦党文豪蔡捷刘风雨万有韩济生邢国刚(北京大学神经科学研究所，基础医学院神经生物学系；教育部和卫生部神经科学重点实验室，北京10o191)摘要目的：研究脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达的变化，并探讨其在神经病理痛形成中的作用。方法：按照双盲随机的原则，将30只雄性SD大鼠随机分为SNL手术组和假手术对照组，每组各1

2、5只大鼠，进行酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组化染色，检测神经病理痛大鼠脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达随时间的变化。结果：(1)ELlSA定量分析显示，脊神经结扎可以显著上调脊髓背角BDNF的含量。sNL后，背角BDNF的含量在24h内即可由手术前的(91．09±7．1)pg／mg总蛋白上升到(160．75±15．0)pg／mg总蛋白(P<0．01)，这种上调的高峰可以持续到SNL后的48h；然而在假手术大鼠，背角BDNF的含量则没有明显的变化。与假手术组相比，SNL大鼠背角BDNF上调的高峰期在24

3、～48h(P<0．O1)，此后其含量开始逐渐恢复，至SNL后28d基本恢复至术前对照水平(P>0．05)；(2)免疫组化染色显示，在脊神经结扎的24h内，sNL大鼠结扎侧背角BDNF的蛋白表达也呈现明显的时间依赖性上调变化。SNL后l2h，背角浅层BDNF免疫反应的平均光密度值即可由手术前的0．18±0．01上调到0．25±0．03(P<0．05)。与假手术组相比，在SNL后的12h和24h，sNL大鼠结扎侧背角浅层BDNF的免疫反应较假手术大鼠也明显上调，其平均光密度值分别由假手术大鼠的0．19±0．02和

4、O．18±O．0l上调到0．25±O．03(P<0．05)和0．23±0．01(P<0．05)。结论：脊神经结扎可以呈时间依赖性的上调脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达，这种上调的BDNF可能在外周神经损伤所引起的神经病理痛的早期发挥作用。关键词脑源性神经营养因子；脊髓背角；神经病理痛；免疫组化；EusA；脊神经结扎UPREGULATIoNoFTHEBRAIN．DERⅣEDNEURoTRoPHICFACToRINTHESPINALDoRSALHoRNoFNEUROPATHICRATSDDUCEDBYSPINAL

5、NERVEUGATloNLIAOFei．Fei，GENGShan．Jing，UUXiao—Dan，DANGWen-Ha0，CAIJie，UUFeng—Yu，WANYou，HANJi—Sheng，XINGGu0一Gang(NeumscienceResearchInstituteandDepanment0fNeur0biol0gy，Pekinguniversity；KeyLab0mtoryf0rNeur0science0ftheMinistry0fEducationandtheMinistry0fPublicHe

6、alth，BeijinglO0083)Abstract0bjective：T0investigatethechangesofBDNFcontentandimmunoresp0nseinthespinaldor-salh0minspinalneI1，eligated(SNL)natsandt0expl0rethemle0fspinalBDNFinthedeVe1opmentofneur0pathicpain．Methods：ThirtymaleSprague—Dawleyratswererand0mlydiVi

7、dedint0SNL—operatedgmupandsham-opemtedgr0up，andeachgrouphasfifteenrats．ThechangesofBDNFeontentandim—munoresponseinthespinaldorsaIhomafterSNL-0rsham-operatedsurgeryweredetectedbyenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)andimmun0hist0chemicalstainingtechniques．R

8、esults：(1)TheBDNFcontentmeasuredbyELISAwassignificantlyincI℃asedafterspinalnenreligati0n．TheBDNFcon—tentincreasedto(160．75±15．O)pg／mgtotalpr0teinflr0m(91．09±7．1)pg／mgtotalpr0tein0fpre-operationduring24