地黄饮子含药脑脊液对Aβ2535诱导PC12细胞损伤即早基因cfos和cjun表达的影响

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1、地黄饮子含药脑脊液对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤即早基因c-fos和c-jun表达的影响作者：谢宁孟菲姚辛敏周妍妍何秀丽【摘要】　　目的探讨古方地黄饮子对β淀粉酶Aβ25～35所致PC12细胞损伤时即早基因c-fos和c-jun表达的调控作用。方法把离体培养的进入对数生长期的PC12细胞分为空白组、模型组、VitE脑脊液对照组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组，待24h细胞贴壁后吸去培养液,6组分别加入正常培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量，加培养液补至等量，37℃孵育2h。然后除正常组加入等量培养液外，其他各组加入经老化处理的Aβ25～35（终浓度为10μm

2、ol/L），继续孵育24h，然后离心收集细胞，提取总RNA。应用RT-PCR二步法和琼脂糖凝胶电泳方法测定c-fos和c-jun基因的表达。结果地黄饮子能下调c-fos和c-jun基因的表达，并呈一定的剂量依赖性。结论地黄饮子脑脊液能明显降低PC12细胞受Aβ25～35刺激时即早基因c-fos和c-jun的过度反应，说明地黄饮子能提高PC12细胞对外界不良刺激的应激性。【关键词】地黄饮子脑脊液PC12细胞即早基因　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheregulative11effectsontheexpressionofIEGc-junandc-fosofDe

3、coctionofrehmanniaeonPC12injuryinducedbyb-amyloid25～35protein(Aβ25～35).MethodsCulturedcellsofPC12weredividedinto6groups:normalgroup,modelgroup,vitaminEgroup,lowdoseofTCMgroup,moderatedoseofTCMgroupandhighdoseofTCMgroup.Sixgroupswererespectivelyaddedtonormalculturedfluid;nomalcerebrospinalfluid,vitEc

4、erebrospinalfluid,lowdoseofTCMcerebraspinalfluid,moderateandhighdoseofTCMcerebrospinalfluidinloggrowthphase,thenaddedculturedfluidtoequal,37℃hatched2hours.ThenormalgroupwasaddedtothesamedoseofculturedfluidandothergroupswereaddedtoAβ25～35dealedwithaging(thefinalconcentrationis10μmol/L),andthensixgrou

5、pswerehatched24hourstogether.AtlasttheywerecentrifugedtoextractthetotalRNA.Theexpressionofc-junandc-fosmeasuredbythemethodsofRT-PCRandagarosegelelectrophoresis.ResultsThegroupofDecoctionofRehmanniaecerebrospinalfluidreducedtheexpressionofc-junandc-fosgene,andshowedsomedose-dependence.ConclusionDecoc

6、tionofRehmanniaecerebrospinalfluidcaneffectivelyreducethehighresponseofc-junandc-fosgeneinPC12cellsinjuredbyAβ25～35.ItshowsthatDecoctionofRehmanniaecerebrospinalfluidcanincrease11PC12cells'irritabilityforexternalillinnervation.　　Keywords:DecoctionofRehmanniae;Cerebroapinal;Pheochromocytomaderivedcel

7、lline(PC12cells);ImmediateEarlygene　　属于神经嵴源细胞之一的PC12细胞与原代培养的细胞相比，同源性较好且较易获取，细胞生存时间长,易于观察。而淀粉样蛋白在老年性痴呆（阿尔茨海默病，Alzheimei'sDisease,AD）患者脑中普遍沉积，由其诱导的PC12细胞的凋亡模型即为老年性痴呆病的一个较贴近的模型。　　即早基因(Immediateearlygene,