地黄饮子含药脑脊液对aβ25

《地黄饮子含药脑脊液对aβ25》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、地黄饮子含药脑脊液对Aβ25作者：谢宁孟菲姚辛敏周妍妍何秀丽【摘要】　　目的探讨古方地黄饮子对β淀粉酶Aβ25～35所致PC12细胞损伤时即早基因c-fos和c-jun表达的调控作用。方法把离体培养的进入对数生长期的PC12细胞分为空白组、模型组、VitE脑脊液对照组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组，待24h细胞贴壁后吸去培养液,6组分别加入正常培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量，加培养液补至等量，37℃孵育2h。然后除正常组加入等量培养液外，其他各组加入经老化处理的Aβ25～35（终浓度为10μmol/L），继续孵育24h，然后

2、离心收集细胞，提取总RNA。应用RT-PCR二步法和琼脂糖凝胶电泳方法测定c-fos和c-jun基因的表达。结果地黄饮子能下调c-fos和c-jun基因的表达，并呈一定的剂量依赖性。结论地黄饮子脑脊液能明显降低PC12细胞受Aβ25～35刺激时即早基因c-fos和c-jun的过度反应，说明地黄饮子能提高PC12细胞对外界不良刺激的应激性。【关键词】地黄饮子脑脊液PC12细胞即早基因　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheregulativeeffectsontheexpressionofIEGc-junandc-fosofDec

3、octionofrehmanniaeonPC12injuryinducedbyb-amyloid25～35protEin(Aβ25～35).MethodsCulturedcellsofPC12algroup,modelgroup,vitaminEgroup,looderatedoseofTCMgroupandhighdoseofTCMgroup.Sixgroupsalculturedfluid;nomalcerebrospinalfluid,vitEcerebrospinalfluid,looderateandhighdoseofTCMcerebrospina

4、lfluidinloggroalgroupedoseofculturedfluidandothergroupsol/L),andthensixgroupseasuredbythemethodsofRT-PCRandagarosegelelectrophoresis.ResultsThegroupofDecoctionofRehmanniaecerebrospinalfluidreducedtheexpressionofc-junandc-fosgene,andshoedose-dependence.ConclusionDecoctionofRehmanniae

5、cerebrospinalfluidcaneffectivelyreducethehighresponseofc-junandc-fosgeneinPC12cellsinjuredbyAβ25～35.ItshoanniaecerebrospinalfluidcanincreasePC12cells'irritabilityforexternalillinnervation.　　Keyanniae;Cerebroapinal;Pheochromocytomaderivedcellline(PC12cells);ImmediateEarlygene　　属于神经嵴源

6、细胞之一的PC12细胞与原代培养的细胞相比，同源性较好且较易获取，细胞生存时间长,易于观察。而淀粉样蛋白在老年性痴呆（阿尔茨海默病，AlzhEImei'sDisease,AD）患者脑中普遍沉积，由其诱导的PC12细胞的凋亡模型即为老年性痴呆病的一个较贴近的模型。　　即早基因(Immediateearlygene,IGE)又称快反应基因、原癌基因(proto-oncogers),该基因家族有包括c-fos和c-jun在内的近百个成员。c-fos和c-jun在正常情况下参与细胞的生长、分化、信息传递、学习和记忆等生理过程，在遭受多种刺激因子，如缺血、缺氧、光线刺激

7、、机械刺激、疼痛刺激等时可被快速诱导过度表达。本实验探讨古方地黄饮子对β淀粉酶（Aβ25～35）所致PC12细胞损伤时即早基因c-fos和c-jun表达的调控作用。　　1材料与仪器　　1.1细胞及动物PC12细胞购自中科院上海生物细胞研究所。大耳白家兔，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。　　1.2地黄饮子组成由熟地、山萸肉、肉苁蓉、石斛、麦冬、五味子、石菖蒲、远志、茯苓、肉桂、炮附子、巴戟天、薄荷等组成（由哈尔滨市松茂药行提供）。　　1.3材料　　Aβ25-35（sigma）,DMEM培养基、胰蛋白酶（Hyclone）,5%胎牛血清（杭州四季青生物制品有限公

8、司），VitE（大连南美制药有限公司）