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时间:2019-05-11
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1、兰州医学院硕士学位论文A型肉毒毒素抑制大鼠胃平滑肌收缩及P物质姓名:张永平申请学位级别:硕士专业:人体解剖与组织胚胎学指导教师:侯一平;宋焱峰2003.5.1摊蝴愀馘P514938A型肉毒毒素抑制大鼠胃平滑肌收缩及P物质摘要目的(1)建立大鼠浆膜下置管双极针型电极胃肌电记录法,模拟经胃镜直视下胃壁注射,以解决长期性、微创性、可控性给药后胃肌电的观察。(2)通过在胃窦前壁注射不同剂量的A型肉毒毒素(BTX.A)后胃肌电的活动变化,探讨BTX.A剂量与肌电改变的量效关系及对胃平滑肌收缩功能的影响。(3)应用放射免疫和免疫细胞化学技术,观察在胃窦前壁注射BTX—A后局部P物质(Substan
2、ceP)含量和分布的变化,揭示两者之间的关系,以阐明BTX—A对胃平滑肌的作用机理。方法(1)根据窝别、体重、雌雄将30只健康Wistar大鼠配对分组为双极针型电极胃肌电记录组(Hara法)及浆膜下置管双极针型电极胃肌电记录组,每组15只。第28天开始记录胃肌电,以12min为单位计算每分钟慢波或快波的频率(rdmin)、振幅(mv/min)和波下面积(mv·s/rain),以及快波发生率(%)。创建经导管可控性、微创性注射药物后双极针型电极胃肌电记录法。(2)60只大鼠(浆膜下置管双极针型电极胃肌电记录模型)随机分为对照组(0.9%氯化钠,n=15)、10U剂量BTX.A组(10U/
3、kg,n=15)、20U剂量BTX—A组(20U/kg,n=15)、40U剂量BTX—A组(40U/kg,n=15)。待稳定的慢波幕线维持30min后根据分组经导管给胃赛前壁缓慢、匀速地注射0.9%氯化钠注射液0.3ml,或者0.3ml含不同对应活性单位的BTX.A。用兰州医学院颁L学位论文药后再记录15min,以确定BTX.A作用胃平滑肌的最佳有效剂量。(3)将30只大鼠(浆膜下置管双极针型电极胃肌电记录模型)随机分为对照组(Agroup,n=15)及BTX—A处理组(Bgroup,n=15)。在Bgroup的实验步骤为:先记录慢波基线稳定的波形维持30min一从导管注射O.3ml的
4、无菌0.9%氯化钠注射液一记录胃肌电30min(取注射0.9%氯化钠后12min作为Atgroup)一注射0.3ml的BTX—A(20U/kg,经实验确定的最佳有效剂量)一记录胃肌电24min(Blgroup)一麻醉后灌注、取材一SP免疫组织化学染色及放射免疫检测SP的含量。Agroup的实验步骤为:先记录慢波基线稳定的波形维持30min一从导管注射O.3ml的无菌0.9%氯化钠注射液2次,间隔30rain一记录胃肌电24miu一麻醉后灌注、驭材一sP免疫组织化学染色及放射免疫检测sP的含量。结果(1)第28天胃肌电各项指标(慢波频率、振幅、慢波下面积;快波频率、振幅、快波下面积及快波
5、发生率),置管双极针型电极记录组与双极针型电极记录组相比较差异无显著性意义(P>O.05)。(2)在胃肌电各项指标中20U剂量BTX-A组与40U剂量BTX.A组比较差异均无显著性意义(户>O.05),而10U剂量BTX.A组与其它两组(20U剂量BTX.A组或40U剂量BTX.A组)之间差异有显著性意义(P0.05);
6、两组在慢波频率、振幅、慢波下面积:快波频率、振幅及快波下面积方面比较差异依然有显著性意义(P<0.05)。(4)放射免疫检测结果提示BTX.A组sP平均含量较对照组低28%(P7、幅、快波下面积和快波发生率,抑制胃平滑肌的收缩功能。(3)BTX—A不但阻碍了胃壁局部副交感神经突触前膜释放乙酰胆碱,而且也减少了胃壁sP的含量,其也可能是抑制胃平滑肌收缩功能的重要原因之一。关键词A型肉毒毒素,P物质,放射免疫测定法,胃,大鼠,免疫细胞化学技术,胃肌电兰州医学院硕士学位论文SPONTANEOUSCONTRACTIONSOFSTOMACHICMUSCLEANDSPWEREINHIBITEDAFTERBTX—AINJECTIONI
7、幅、快波下面积和快波发生率,抑制胃平滑肌的收缩功能。(3)BTX—A不但阻碍了胃壁局部副交感神经突触前膜释放乙酰胆碱,而且也减少了胃壁sP的含量,其也可能是抑制胃平滑肌收缩功能的重要原因之一。关键词A型肉毒毒素,P物质,放射免疫测定法,胃,大鼠,免疫细胞化学技术,胃肌电兰州医学院硕士学位论文SPONTANEOUSCONTRACTIONSOFSTOMACHICMUSCLEANDSPWEREINHIBITEDAFTERBTX—AINJECTIONI
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