蒙药索布如札特巴提取物的抗氧化活性研究

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1、蒙药索布如·札特巴提取物的抗氧化活性研究作者：敖恩宝力格，王金妞，邰丽华【摘要】　　目的研究蒙药索布如·札特巴的抗氧化作用。方法采用无水乙醇和蒸馏水分别对蒙药索布如·札特巴进行超声波提取，检测其提取物对于二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基的清除作用，以及对β-胡萝卜素-亚油酸氧化体系的抑制作用。结果索布如·札特巴乙醇提物和水提取物对DPPH自由基有较好的清除作用，其达到50%清除率所需浓度IC50值分别为0.8g/L和1.2g/L；而且对β-胡萝卜素-亚油酸氧化体系有明显的抑制作用，其IC50值分别为1.1g/L和1.5g/L。结论索布如·札特的乙醇提取物及水提取物具有抗氧化活性，80%乙醇提

2、取物的抗氧化作用明显高于水提取物。【关键词】蒙药；索布如·札特巴；抗氧化性蒙药索布如·札特巴是由石榴、豆蔻、广枣等8味蒙药材组成。主要功能是祛寒、除湿；用于痰、寒、气三型的心脏病的治疗［1］，但迄今未见对其药理学方面的研究报道。6在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种自由基和活性氧，过多的活性氧与自由基通过损伤生物大分子，破坏细胞的结构和功能，促使疾病的发生与发展。研究发现，氧自由基与衰老、肿瘤、炎症、动脉硬化、肝和肺疾病等发生密切相关。抗氧化剂由于能清除人体的这些自由基而具有预防癌症、心血管疾病等疾病以及抗衰老的作用［2，3］。而人工合成的抗氧化剂如BHA等可导致DNA的损伤及恶性肿瘤的发

3、生而其安全性受到质疑，因此高效、安全的天然抗氧化剂的提取及其应用无疑具有重要的意义。蒙药是中华民族的瑰宝,历史悠久，在治疗疾病中发挥了独具特色的作用，但就其开发利用来讲，还比较落后。本文旨在通过测定蒙药索布如·札特巴抗氧化活性，为合理地开发利用这一宝贵的民族药物提供参考，并为开发天然抗氧化剂提供新的实验依据。　　1材料与仪器蒙药索布如·札特巴由内蒙古中蒙医院提供。二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基、β-胡萝卜素、亚油酸由美国sigma公司提供。2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和抗坏血酸（Vc），无水乙醇，吐温40，氯仿等均为国产分析纯试剂。实验用水为二次石英亚沸蒸馏水。主要仪器有721型分光光

4、度计、KQ3200V型超声波清洗器、FA2104N电子天平等。　　2方法6　　2.1提取方法准确称取样品5.00g于100ml锥形瓶中，加入80%浓度的乙醇（或蒸馏水）50ml，浸泡6h，超声辅助提取（12kHz，10min），过滤，滤液用冷冻干燥仪干燥，称重，然后用浓度为10%的DMSO（dimethylsulfoxide）溶液使其溶解并用蒸馏水稀释至一定体积。　　2.2DPPH自由基的清除活性的测定DPPH自由基溶解于无水乙醇配成0.05mmol/L的溶液。将0.1ml不同浓度的蒙药提取物溶液加入4mlDPPH溶液中，迅速混匀，在黑暗的环境中放置60min后在517nm处测定溶液的吸光度

5、。以抗坏血酸为对照。样品清除自由基的能力由下面的公式得出：抗氧化率（%）=〔(Ac-As)/Ac〕×100%。式中Ac及As为60min后空白及待测样的吸光值。　　2.3β-胡萝卜素抗氧化率的测定将0.15mgβ-胡萝卜素溶解于15ml氯仿，加入30mg亚油酸和200mg吐温40，然后于50℃旋转真空干燥。加入75ml无氧蒸馏水，于超声波中形成乳化液。取0.1ml样品乙醇液与5ml乳化液于试管中混合，以不加提取物样品的等量乙醇代替与乳化液混合作为空白样。在45℃保温，于波长为460nm处测定吸光度。同时采用BHT进行对照实验。抗氧化率用下式进行计算。抗氧化率（%）=100(△C-△S)/△C

6、。式中,△6C=〔ln(Ac0/Ac60)/60〕；△S=〔ln(As0/As60)/60〕；△C为对照吸光值的降低率，△S为样品吸光值的降低率；Ac0与As0分别为t=0min时对照与样品的吸光度；Ac60与As60分别为t=60min时对照与样品的吸光度。　　3结果　　3.1DPPH自由基清除活性分析DPPH自由基是比较稳定的有机物自由基，广泛应用于测定纯抗氧化剂或植物提取物的体外抗氧化活性［4～6］。本研究以抗坏血酸为参照，利用该法对比了两种提取物的DPPH自由基清除效果。如图1所示，抗坏血酸及索布如·札特巴80%乙醇提取物和水提取物的DPPH自由基清除能力随其浓度升高而显著增强，且8

7、0%乙醇提取物的抗氧化作用明显强于水提取物。在本试验条件下，抗坏血酸的半数抑制浓度(IC50)约为0.4g/L，索布如·札特巴80%乙醇提取物的IC50约为0.8g/L，而水提取物的IC50约为1.2g/L，可见索布如·札特巴的乙醇及水提取物具有较好的抗氧化作用。　　3.2β-胡萝卜素-亚油酸氧化体系的抑制分析β-胡萝卜素氧化抑制试验法主要评价的是抗氧化物质在乳化脂质体系中的抗氧化能力。图2为采用β-胡萝卜素