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时间:2019-05-11
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1、复旦大学硕士学位论文延迟亚低温治疗对大鼠永久性大脑中动脉阻塞后凋亡相关蛋白表达的影响姓名:吕佳宁申请学位级别:硕士专业:神经病学指导教师:范薇20070512论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其他机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名:论文使用授权声明本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其
2、它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵循此规定。作者签名:嵫导师签名:日期加Z珂I≯复旦大学硕士学位论文延迟亚低温治疗对大鼠永久性大脑中动脉阻塞后凋亡相关蛋白表达的影响中文摘要目的脑缺血是人类主要致残疾病之一,目前尚缺乏行之有效的治疗方法。大量实验证明,亚低温治疗能够减轻缺血性脑损伤,是目前对于缺血性脑损伤最有效的神经保护措施。本研究应用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanentmiddlecerebralarteryocclusion,pMCAO)模型,延迟给予亚低温治疗,观察其对永久性脑缺血的神经保护作用及作用途径,并探讨延迟亚低温治疗永久性脑缺血的有效起始时间和持
3、续时间。方法30只雄性SD大鼠,线栓法制备永久性大脑中动脉阻塞模型,随机分为3组,每组10只。亚低温治疗组包括A组和B组。A组(亚低温延迟2h组):pMCAO后延迟2h给予亚低温(32.5~33.5℃)治疗22h;B组(亚低温延迟6h组):pMCAO后延迟6h给予亚低温(32.5~33.5℃)治疗18h。缺血对照组(C组):pMCAO后放置于室温(2512)。制备pMCAO模型过程中,应用激光多普勒血流监测仪监测局部大脑中动脉供血区脑血流量,插入栓线后大脑中动脉(middlecerebralartery,MCA)供血区血流骤降至基础水平的20~30%时提示模型制备成功。通过
4、将实验大鼠放置于0~4"C的冰箱中来降低实验大鼠的全身体温,通过直肠探头持续监测直肠温度,使亚低温治疗组实验大鼠直肠温度维持于32.5~33.5℃。实验过程中监测大鼠尾失血糖。pMCAO后24h,3组实验大鼠灌注、固定、取脑、制备冰冻切片,进行Bcl-2、Bax、Caspase-3免疫组织化学染色。结果亚低温治疗组实验大鼠直肠温度稳定维持于32.5~33.5℃之间。缺血对照组(c组)大鼠在pMCAO后出现自发性体温升高。免疫组织化学染色结果显示,3组实验大鼠Bcl-2免疫阳性细胞主要分布于缺血半暗带区域,这一区域的神经细胞仍有存活能力iBax和Caspase.3免疫阳性细胞
5、更多的分布于缺血核心区域,这一区域的神经细胞已经死亡或即将死亡。与缺血对照组(C组)比较,亚低温治疗组似组和B组)BcI=2蛋白表达显著增多,Bax蛋白表达显著减少,Bcl-2/Bax比值显著升高,Caspase.3蛋白表达显著减少。亚低温治疗组组内比较,即A组和B组之间比较,Bcl-2蛋白的表达、Bax蛋白的表达、Bcl=2/Bax比值以及Caspase.3蛋白的表达均无显著性差异。复旦大学硕士学位论文结论pMCAO后延迟2h给予亚低温治疗22h和pMCAO后延迟6h给予亚低温治疗18h,均能增加Bob2蛋白的表达,降低B缸蛋白的表达,降低Bcl.2/B强比值,降低Cas
6、pase.3蛋白的表达。延迟亚低温治疗通过抑制BcI.2基因家族蛋白介导的线粒体依赖性Casp西e激活途径,抑制Casp雏e介导的细胞凋亡途径,从而发挥神经保护的作用。永久性脑缺血后延迟6h给予亚低温治疗18h仍然具有神经保护作用。在脑缺血的治疗过程中,要尽早给予亚低温治疗,以保护更多的神经元和更好地促进神经功能的恢复。关键词亚低温;延迟;永久性大脑中动脉阻塞i凋亡;凋亡相关蛋白2复旦大学硕士学位论文Effectofdelayedmildhypothermiaontheexpressionofapoptosis-regulatingproteinsaftertheperma
7、nentmiddlecerebralarteryocclusioninratsAbstractBackgroundandpurposeCerebralischerniaisamajorsour∞ofdisability,butthereisnoeffectiveUreatmenttoaLlrethisdiaseas.Mildhypothermiahasbeenprovedto砒∞ischemicinjury,andispossiblythemosteffectivemethodofneruoprotectionfo
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