N4羧基苯钐维甲酰胺对HL60细胞增殖、凋亡的实验研究

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1、兰州医学院硕士学位论文N-（4-羧基苯）钐维甲酰胺对HL-60细胞增殖、凋亡的实验研究姓名：李成檀申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：李文惠2003.5.1N．(4．羧基苯)钐维甲酰胺对HL-60细胞增殖、凋亡的实验研究摘要目的：研究N．(4。羧基苯)钐维甲酰胺[SamariumComplexofN一(4．carboxyphenyl)Retinami，Smcomplexl对人早幼粒白血病细胞株HL．60的增殖、凋亡的影响。方法：应用MTT法、克隆分析法检测N一(4．羧基苯)钐维甲酰胺对HL．60细胞的增殖抑制，台盼蓝染色

2、研究其抑制增殖的可能机制，光镜、电镜观察其对细胞形态的影响，琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯带，流式细胞仪检测诱导凋亡程度，逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测细胞凋亡的基因bcl一2的表达。结果：(1)10一．10’6M的N．(4．羧基苯)钐维甲酰胺对细胞的增殖有抑制作用，与对照组相比，有统计学意义(p<0．01)，抑制作用随药物浓度增加而增强。(2)N．(4．羧基苯)钐维甲酰胺对细胞的抑制作用呈时间效应兰!!堡兰堕堡主兰垫堕奎一一⋯．——关系．其最有效的时间范围为24h一72h。(3)N．(4．羧基苯)钐维甲酰胺对细胞的抑制作用不是由于

3、其细胞毒作用所致。(4)N，f4。羧基苯)钐维甲酰胺有诱导HL．60细胞凋亡的馋耀，光镶、电镜鼹察细胞表现出较为典型的缨胞凋亡的形态：细胞核圈缩，染色屡凝集断裂；琼脂糖凝胶逛泳出现提亡特有的梯形条带：流式细胞仪出现典型熬鼹二倍体峰。(5)N．(4一羧基苯)钐维荦酰胺傻}琵一60缨臆bel2表达下谲。结论：N一(4一羧基苯)钐维甲酰胺对HL一60缩脆有抑制增殖、诱导凋亡的作用，其诱导凋亡的机理与下调bcl一2表达有关。关键词：N一(4一羧基苯)钐维甲酰胺，人早幼粒白血病细胞株HL-60，增殖，凋亡，bcl一2兰!!堡茎堕堡主兰笪笙兰——EX

4、PERIMENTALSTUDYONTHEEFFECTSOFSAMARIUMCOMPLEXOFN—f4一CARBOXYPHENYL)RETINAMIoNPRoLIFERATloNANDAPoPTOSIS0FHL．60ABSTRACTOBJECTIVES：TostudytheeffectsofsamariumcomplexofN一(4一carboxyphenyl)retinamiOnproliferationandapoptosisofhumangranulocyticJeukezniaHL．60cell．METHODS：Tostudythe

5、effectofsamariumcomplexofN一(4一carboxyphenyl)retinamioninhibitionsproliferationofIlL-60cellsanditsmechanise，MTTassay，cloneinhibitingexperimentandtrypanblaudyewereusedinthisexperiment．TheHL一60cellmorphologywasobservedbylightmicroscopeandelectronmicroscope，DNAladderbyagarose

6、gelafterelectrophoresisandthedegeeofapoptosisbyflowcytometenTheexpressionofbcl-2mRaNAwasdetectedonagarosegelthroughelectrophoresisafterRT·PCR．RESULTS：(1)10一·10-oMSamariumcomplexofN-(4-carboxyphenyl)retinamicaninhibitproliferationofIlL一60cellindose·effectrelations(p‘0．01，兰

7、州医学院硕士学位论文comparedwithcontrolgroup)．TherateofinhibitionisenhancedwithSmcomplexincreasinginconcentration。(2)SmcomplexofN一(4-carboxyphenyl)retinamicaninhibitproliferationofIlL一60cellintime-effectrelations，thebesttimerangesfrom24hto72h．(3)TheinhibitiveeffectofSmcomplexofN-(4

8、-earboxyphenyl)retinamionproliferationofHL一60cellisnotduetothetoxicityofthedrug．(4)i04-104MSmcom