大鼠肺移植供肺缺血再灌注的自噬水平变化

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1、分类号：密级：UDC：学号：416523212103南昌大学专业学位研究生学位论文大鼠肺移植供肺缺血再灌注的自噬水平变化TheautophagylevelchangesofratlungtransplantationforPulmonaryischemiareperfusion戴斌培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名、职称：吴起才主任医师专业学位种类：临床医学专业领域名称：外科学（心胸外科）论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：评阅人：2015年6月学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研

2、究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描

3、等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：实验通过建立大鼠原位肺移植模型，利用实验动物学及分子生物学的技术，阐明大鼠肺移植供肺灌

4、注、冷缺血、再灌注后自噬水平变化，为调控自噬水平，减轻肺移植缺血再灌注损伤提供理论依据。方法：1、分组并建立模型：SPF级雄性SD大鼠，共60只，质量300～350g。随机挑选12只作单纯灌注冷缺血处理，其中6只作为单纯灌注冷缺血0h对照，另外6只作单纯灌注冷缺血后保存6h处理；其余48只分为供、受体，受体略大于供体，供、受体间质量差不超过20g，进行左肺移植手术。本实验共分五组：①CON组即灌注后，冷缺血保存0h组；②ISC6组即灌注后，冷缺血保存6h组；③REP2组即灌注后，先冷缺血保存6h，移植后再灌注2h组；④REP6组即灌注后，先冷缺血保存6h，

5、移植后再灌注6h组；⑤REP12组即灌注后，先冷缺血保存6h，移植后再灌注12h组。其中CON,ISC6组各6例，REP2,REP6,REP12组各移植6对大鼠。2、分子生物学检测：免疫荧光双染LC3,LAMP-2，检测自噬流，Westernblot检测LC3-II/LC3-I。结果：1、成功建立了一种经过改良了肺移植技术的大鼠原位左肺移植模型；2、通过免疫荧光双染LC3,LAMP-2，发现：CON组自噬流最低，ISC6组自噬流稍升高，REP2,REP6组自噬流显著升高，其中REP6组自噬流最高，REP12组自噬流降低。3、通过Westernblot检测L

6、C3蛋白表达发现：CON组LC3蛋白表达最低，ISC6组LC3蛋白表达稍升高，REP2,REP6组LC3蛋白表达显著升高，其中REP6组LC3蛋白表达最高，REP12组LC3蛋白表达降低。结论：大鼠肺移植供肺灌注、冷缺血6h后自噬水平开始增高，再灌注2h的自噬水平明显增高，再灌注6h达到高峰，再灌注12h后自噬减轻。II摘要关键词：自噬，肺移植，缺血再灌注损伤，大鼠IIIAbstractABSTRACTObjective:Experimentthroughtheestablishmentoforthotopiclungtransplantationmode

7、linrats,usingtheexperimentalzoologyandmolecularbiologytechnology,expoundstheautophagylevelchangesofratlungtransplantationforpulmonaryperfusion,coldischemiaandreperfusion,andregulatesthelevelofautophagytoreduceischemia-reperfusioninjurytoprovidetheoreticalbasisforlungtransplantatio

8、n.Methods:1.Setupthegroupandestab