pin1介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中sirt1核—浆穿梭改变

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1、中图分类号：R72:R722一--■;m^SICHUANMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文'廷.Pin1介导离氣诱导人肺泡上皮细胞凋亡中S丨RT1核-楽穿梭改变謂_♦_、匕毫，.、-....院（系)、所临m研究生姓名,固^踊j学科、专並儿科学（新生儿专业）v_:.导师姓名董文斌教授二〇一五年五月四川医科大学毕业硕士研究生学位论文独创性声明及发表承诺书本人声明所呈交的学位论文（已整理成发表形式）是我个人在四川医科大学导师指导下，由导师及四川医科大学提供一切科研条件的情况下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究

2、成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在即将毕业离校之际，本人郑重承诺：该论文将以四川医科大学的名义发表（论文作者为研究生及导师，作者所在单位为四川医科大学），并在发表后立即将发表论文原件（期刊）寄与导师1册。学位论文作者签名：J日期：年《月/f曰四川医科大学硕士学位论文版权使用授权书本人完全了解四川医科大学有关保留、使用学位论文的规定，g卩；四川医科大学有权保留并向有关部门或机构送交本人学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，允许有关部门或机构以电子出版物形式出版发行，并对外进行全文内容服务。本人授权四川医科大学可以将本人学位论文的全部或部分

3、内容编入有关数据库进行检索，进行数字化处理汇编、通过网络或其它途径进行交流传播，可以公布学位论文的全部或部分内容，可以釆用影印、缩印、扫描或其他复制手段保存和汇编学位论文，即四川医科大学具有本人学位论文的数字化制品复制权、信息网络传播权和汇编权。同时授权将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《万方数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。保密口，在..年解密后适用本授权书。本人提交的学位论文属不保密Y(请在以上方框g打‘;学位论文作者签名：t日期：办丨S：年f月IV日地址及邮政编码：联系电话：一联系电话:电子信箱：本研究基金来源：1.中华儿科杂志第二届双鹤珂立苏科研基金（编号：cjp

4、-009）2.四川省教育厅科研项目基金（编号：08ZA150-033）3.四川省卫生厅科研基金（编号：110340）4.泸州市科技局（泸州市政府-泸州医学院联合专项资金）（编号：2013LZLY-J08）5.四川省科技厅项目（编号：4ZQ010-023）目录1Pin1介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭改变……………………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………31.3前言……………………………………………………………51.4材料与方法…………………………………………

5、…………71.5结果……………………………………………………………161.6讨论……………………………………………………………211.7结论……………………………………………………………251.8参考文献………………………………………………………261.9英汉缩略词对照表……………………………………………322致谢……………………………………………………………..333SIRT1在炎症反应和细胞衰老的研究进展(综述)……344攻读硕士学位期间发表和撰写的文章………………………57Pin1介导高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡中SIRT1核-浆穿梭改变摘要目的：Pin1是人类肽基脯氨酰异构酶，实验组前期

6、发现，Pin1参与细胞氧化应激通路，抑制其表达后可能够减少高氧所造成的肺损伤，而SIRT1称为沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1，主要定位于细胞核中，其发挥活性参与调节细胞氧化应激过程。本实验建立在稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶（Pin1）表达的A549细胞系基础上，当暴露于高氧环境下，SIRT1能否发生核-浆穿梭反应，导致SIRT1活性降低，抗氧化应激能力下降，增加高氧肺损伤可能，而在抑制了Pin1表达的A549细胞中能否减轻SIRT1核-浆穿梭反应，从而减轻高氧肺损伤。方法：通过本实验组前期实验获得稳定抑制Pin1表达的A549-Pin1shRNA细胞系。随后将实验分为三组：对照组、高氧组,

7、A549-Pin1shRNA组。对照组是通过含有10%胎牛血清和1%青链霉素的1640培养基中常规培养。高氧组及A549-Pin1shRNA组均通过通入3L/min的95%氧气和5%二氧化碳高纯混合气10min，并在培养箱中密培养24h的高体积分数氧（高氧）诱导细胞。培养结束后收集细胞进行以下检测:倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态学改变；采用SP细胞免疫化学方法检测各组细胞中Caspase3、p