线粒体ATP敏感钾通道对高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的保护作用.pdf

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1、．本研究基金来源：四川省教育厅科研项目基金(编号：08ZAl50-033)四川省卫生厅科研基金(编号：90191)h’’l线粒体ATP敏感钾通道对高氧诱导高氧诱导人肺泡上皮细胞亡的的保护作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．：．⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯151．6讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯231．7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯331．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯341．9英汉缩略词对照表⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l2致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423新生儿高氧肺损伤的肺修复机制与保护策略(综述)4攻读硕士学位期间发表和撰写的论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53、泸州医学院研究生硕士论文线粒体ATP敏感钾通道对高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的保护作用。摘要目的：探

3、讨线粒体ATP敏感钾通道(mitochondrialATP．sensitivepotassiumchannel,mitoKATP)对高氧诱导人肺泡上皮细胞凋亡的保护作用。方法：以人肺泡上皮A549细胞为研究对象，体外传代培养A549细胞系。以3L／min的900ml／L氧气和50ml／L二氧化碳高纯混合气作为攻击因素处理A549细胞。实验将A549细胞共分为三组：对照组(n=8)、高氧组(n-8)，二氮嗪组(n-8)。对照组：加入含100mL／L胎牛血清培养液常规培养；高氧组：加入等量含IOOmL／L胎牛

4、血清培养液，换液后，通入3L／min的90％氧气和5％二氧化碳高纯混合气10min，密闭培养；二氮嗪组：用终浓度为lOOpmol／L的等量二氮嗪培养液预处理24h后，再用高氧诱导A549细胞，密闭培养12、24、48h收集细胞指标检测如下指标：倒置相差显微镜下观察A．549细胞的形态学改变并照相；CCK．8法检测A549细胞活力；流式细胞仪检测细胞凋亡；免疫组化法检测细胞内Omi／HtrA2的表达；激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位变化：透射电镜法检测细胞超微结构的变化。结果：(1)倒置显微镜下：对照组细胞

5、贴壁良好，呈铺路石样，为扁圆的多角形，细胞排列紧密，连接成片，数量多，悬浮细胞少，分裂相多。高氧组细胞受损明显，形态改变，由典型的扁圆多角形细胞变为圆形或椭圆形，‘细胞间空隙加大，连接松散，活细胞数量明显降低，悬浮细胞明显增多；二氮嗪组细胞损伤状况明显得到改善，细胞生长状况明显好转，形态明显泸州医学院研究生硕士论文变好，较高氧组活细胞数量增加，悬浮细胞数减少，但未恢复到对照组水平；(2)与对照组(O．34士0．03)H5，高氧组细胞活力(O．13士0．02)下降(P

6、活力(O．21士0．04)增加，但未恢复至对照组水平(P

7、07)flfJ显降低，差异有显著性俨

8、核小，圆形，胞质电子密度较高，线粒体呈空泡状，线粒体嵴减少。结论：二氮嗪可能通过稳定线粒体膜电位，减少Omi／HtrA2表达，从而减少A549细胞凋亡来明显减轻高氧诱导的人肺泡上皮细胞的损伤。关键词：高氧，肺损伤；A549：二氮嗪，线粒体ATP敏感钾通道；凋亡：Omi／HtrA2泸州医学院研究生硕士论文TheProtectionEffectsandMechanismsofMitochondrialATP··sensitiveP