不同喂养方式婴儿肠道菌群分布特征的初步研究

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1、分类号：R174密级：不保密UDC：613.2学校代码：11065硕士学位论文不同喂养方式婴儿肠道菌群分布特征的初步研究孙凤春指导教师张文卿教授学科专业名称病原生物学论文答辩日期2015年6月2日摘要目的：通过对肠道双歧杆菌计数及基于ERIC-PCR指纹图谱分析技术探讨不同喂养方式健康婴儿肠道菌群分布特征。方法：62例30～120d健康婴儿作为研究对象，按喂养方式不同分为：母乳喂养、国产奶粉喂养、进口奶粉喂养及混合喂养四组。采集婴儿新鲜粪便标本。一份通过厌氧法分离培养并计数肠道双歧杆菌。另一份提取肠道细菌总DNA，通过ERIC(肠杆菌基因间共有序列)-PCR指纹图谱分析法寻找不同组间差异条

2、带；回收差异条带并进行克隆、测序；用Blast对所获序列进行同源菌检索及其编码蛋白的功能分析。结果：母乳喂养组与混合喂养组婴儿肠道双歧杆菌活菌数（9.10±1.33cfu/g；8.62±1.35cfu/g）高于国产奶粉及进口奶粉喂养组（7.62±1.22cfu/g；7.32±0.80cfu/g，P<0.05）；而母乳与混和喂养组之间及两个奶粉喂养组之间无显著差异。所有个体肠道菌群ERIC-PCR指纹图谱条带丰富，不同组间ERIC-PCR条带对比分析发现两条差异条带（A：1100bp；B：1000bp），其中A条带主要见于母乳、国产奶粉及混合喂养组婴儿，B条带主要见于进口奶粉喂养组婴儿；测序

3、及Blast分析结果显示，A、B克隆各获得两个序列（A1/A2；B1/B2），该四个序列的同源菌均为长双歧杆菌；A序列编码产物为糖代谢相关酶类；B序列编码产物为蛋白代谢相关酶类。结论：母乳及混合喂养婴儿肠道中双歧杆菌数量多于奶粉喂养婴儿；国产奶粉喂养婴儿肠道中菌群分布更接近于母乳喂养婴儿。硕士研究生：孙凤春（病原生物学）指导老师：张文卿教授关键词：婴儿；肠道菌群；喂养方式；ERIC-PCR；双歧杆菌PreliminarystudyofintestinalfloradistributionininfantsbydifferentfeedingpatternsAbstractObjective

4、：ToinvestigatethecharacteristicofintestinalflorainhealthyinfantsbydifferentfeedingpatternswiththemethodofbifidobacteriacountingandtheanalysisofERIC-PCRfingerprinting.Methods：62casesofhealthyinfants(30~120days)fromtheChildHealthClinicofdifferenthospitalsinQingdaowereinvolvedinthestudy.Theyweredivid

5、edintofourgroupsaccordingtotheirfeedingpatternswhichwerebreast,importedpowderedmilk,domesticpowderedmilkandmixedfeeding.Thesamplesoftheirfreshfeceswerecollected.Bifidobacteriawereisolatedinanaerobicboxandtheircolonieswerecountedinonepartofeachsample.Foranotherpart,totalDNAofintestinalflorawasextra

6、ctedandERICfingerprintswereamplifiedwiththemethodofERIC-PCR(enterobacterialrepetitiveintergenicconsensus-polymerasechainreaction).Afterthat,twospecificbands(A:1100bp,B:1000bp)observedindifferentgroupswereclonedandsequenced.HomologoussequenceandthefunctionoftheirencodingproteinswereanalyzedbyBlast(

7、BasicLocalAlignmentSearchTool).Results：Thecoloniesofbifidobacteriaweremoreinbreastandmixedfeedinggroups(9.101±1.33cfu/g;8.62±1.35cfu/g)thanthatofdomesticandimportedpowderedmilkfeedinggroups(7.62±1.22cfu/g;7.32±0.