籼稻成熟胚诱导培养特性及其褐化防控的研究

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1、分类号：密级：一－矣＾＾聲硕±研究生学位论文抽＃成熟胆诱导培养特，隆及其褐化防控的研究１，山专业；植物学研究方向：植物生物技术研究生：范凯指导教师：严奉伟教授田志宏教授广论支起止日期：２０１３年９月至２０１５年５月：分类号：密级硕±研究生学位论文抽稿成熟胚诱导培养特性及其褐化防控的研究专业：植物学研究方向：植物生物技术研究生：范凯指导教师：严奉伟教授田志宏教授论文起止日期：２０１３年９月至２０

2、１５年５月Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎ化ｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｏｆｍａｔｕｒｅｅｍｂｒｙｏｓｏｆｉｎｄｉｃａｒｉｃｅａｎｄｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｔｈｅｃａｌｌｕｓｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅＭａｏｒ：ＢｏｔａｎｙｊＤｉＫｃｔｉｏｎｏｆＳｔ；ｕｄＰｌａｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｙ：ｇｙＧｒａｄｕａｔｅＳｔｕｄｅｎｔ：ＫａｉＦａｎＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＦｅｎｗｅｉＹａｎ

3、ｐｇＰｒｏｆ．ＺｈｉｈｏｎｇＴｉａｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅＹａｎｔｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＳｅｔｅｍｂｅｒ２０１３化Ｍａ２０１５ｐ，ｙ，摘要一水稻是世界上主要粮食作物之，种植面积广，需求量大。釉稻和稷稻是水稻的两个主要亚种，全球８０％的稻米生产基于釉稻，。它们的组织培养特性差异大釉稻比梗稻的再化频率低，严重阻碍着基因工程技术在水稻育种中的应用。高频再尘体系是水稻遗传转化的基础，但还没有适用于所有釉稻品种的高效遗传转化体系，，。由于釉稻

4、是我国的主要水稻品种因此遗传转化技术的成熟对釉稻进行改良具有重要意义。本文选用了５个釉稻品种９３１１、明恢６３、双抗明占、佳福占和民５２７成熟化为外植体材料，研究了不同培养基、植物生长调节剂种类和浓度等因素对５个釉稻成熟化愈伤组织诱导的影响，从而优化釉稻成熟胚培养体系一５，Ｗ期建立个高频再生体系。研究了个釉稻品种成熟胚愈伤组织诱导过程中的生理生化特性及不同抗氧化剂对５个釉稻品种成熟胚愈伤组织继代培养过程中褐化的影响，Ｗ期为釉稻愈伤组织继代培养中的褐化问题提供理论依据。主要研

5、究结果如下：１１．１１、明６３、民５２７＾釉稻％恢双抗明占的成熟胚作为研究材料，、佳福占和确定了水稻组织培养较好的基本培养基（ＭＳ）、Ｗ及ＷＭＳ为基本培养基，附加化頗糖－３０ｇ、８ｇ／Ｌ琼脂和２ｍｇ／Ｌ２．４Ｄ相同成分的基础上，再添加不同植物生９３１１６３长调节剂种类和浓度，研究结果表明，釉稻、明恢、双抗明占、佳福占、＋－民５巧成熟胚愈伤组织诱导适宜的条件分别为１ｍ／ＬＫＴ１ｍ／Ｌ６ＢＡ＋３ｍ／Ｌｇｇｇ－ＮＡＡｍ／ＬＫＬ６－ＢＡ＋１ｍ．／ＬＮＡＡ，．Ｔ＋０

6、．５ｍＢＡ＋３，１ｇＴ＋１ｍｇ／５ｍｇ０５ｇ／ＬＫｇ／Ｌ６ｍ－－ｇ／ＬＮＡＡ，１ｍｇ／ＬＫＴ＋ｌｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋３ｍｇ化ＮＡＡ，０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ。釉稻％１１、明恢６３、双抗明占、佳福占、Ｒ５２７成熟胚愈伤组织在适宜条件下诱导，其诱导〇〇〇率分别达到２４．６７％、２８／〇、２３．３３／〇、；２７Ｊ３％、２２．６７／〇。２．选取軸稻９３１１、明恢６３、双抗明占、佳福占和民５２７的成熟胚接种于适宜的培养基中，分别取接种不同时期不同材料的愈伤姐织，研

7、究其愈伤诱导过程中可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性、过氧化氨酶（ＣＡＴ）活性、丙二酸（ＭＤＡ）含量和多献氧化酶（ＰＰＯ）活性的变化，并对不同釉稻诱导率与诱导过程中可溶性蛋白含量变化和酶活变化的相关性进行分析。研１、２７究结果表明，９３１明恢６３、双抗明占、佳福占和民５成熟胚愈伤组织细胞内可溶性蛋白含量变化和酶活变化在初末两个时期变化庭势有所不同。这些可溶性蛋白含量和酶活性与诱导率有一定的相关系。其中可溶性蛋白含量的变化量与诱导率成负相关；Ｓ

8、ＯＤ活性的变化量与诱导率成负相关：ＰＯＤ活性的变化量与诱导率成正相关；ＣＡＴ活性的变化量与诱导率成显著正相关；ＭＤＡ含量的变化量与诱导率成负相关ＰＰＯ。；活性的变化量与诱导率成正相关３．在继代培养基中添加不同浓度的抗氧化剂（聚乙稀化咯烧剛（ＰＶＰ）、抗坏血酸（ＶＣ）、梓樣酸）对不同灿稻品种％１１、双抗明占、明恢６３、佳福占、Ｉ民５乃愈伤组织褐化的影响。研究结果表明，不同浓度的ＰＶＰ、ＶＣ和梓樣酸分别