不同培养体系对白木香成熟胚丛芽诱导的影响研究论文

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1、不同培养体系对白木香成熟胚丛芽诱导的影响研究论文【摘要】目的初步筛选出最适合白木香胚愈伤组织诱导的培养基，为白木香胚的继代培养和植物再生研究打下基础，为展开白木香的种质保存和继代培养的研究提供参考依据。方法通过各种激素成分的正交实验设计，以白木香成熟胚为材料，诱导愈伤组织和丛芽。结果发现以1/2MS0：1/2MS培养基的诱导率最高，为100％；而诱导效果则以MIZ：MS+IAA0.1mg/L+ZT0.5mg/L培养基为最佳。结论综合考虑各种因素，以MIZ培养基为最适合诱导白木香胚愈伤组织的培养基。【关键词】白木香；成熟胚；丛芽Abstract：ObjectiveT

2、oselectthefittestculturemediumsforinducingcallusesfromembryoofAquilariasinensis(Lour.)Gilg.MethodsThroughorthogonaldesignfortheponentofseveralkindsofhormone,theembryoediums.ResultsInductionrateon1/2MS0culturemediumedium.ConclusionMIZculturemediumostsuitableforinducingcallusesfromembry

3、oofAquilariasinensis(Lour.)Gilg.Keyediums;Calluses白木香［1］Aquilariasinensis(Lour.)Gilg又名土沉香，来源于瑞香科沉香属植物。白木香是我国特有的药用植物.freell，进行高压灭菌。1.3接种方法将种子用洗洁精轻轻荡洗一遍后，在自来水下流动冲洗20～30min，材料经上述处理后，在无菌条件下，用75％的酒精浸泡消毒8～10s，然后置于0.1％的升汞溶液中灭菌消毒5～8min，再用无菌水洗涤7～10次。在接种时，将白木香种子的种壳及附属物剖去，取出胚，接种到培养基中，每瓶培养基接种3～4个

4、胚。1.4培养条件置于培养室中进行培养，光照强度2500Lx，每日光照8～10h，培养温度（26±0.2）℃。2结果实验操作如上所述，60d后结果记录见表2。表2不同培养基对白木香胚愈伤组织诱导率的影响（略）由表2可以看出，1/2MS0培养基的愈伤组织诱导率最高（100％），其次为1/2MB0.2和MIZ培养基（≈90％）；1/2MB0.5、MB0.5及MB0.05等培养基的诱导率一般（60％～75％）；而MBD、1/2MBN、MBN、IB1和1/2MKI等培养基的诱导率极低（约为0），不适于白木香胚愈伤组织的诱导。生长在1/2MS0上胚的愈伤组织颜色浅绿，质地较

5、为致密，出愈率高（100％），但是生长速度慢，而且愈伤组织在生长的过程中容易发生褐化的现象，导致愈伤组织的出苗率不高（54％）。1/2MB0.2培养基上的愈伤组织颜色较绿，质地酥脆，玻璃化现象比较严重，因此，愈伤组织的出苗率也不高（43.48％）。而生长在MIZ培养基上的愈伤组织颜色深绿，质地致密，不容易褐化也不容易玻璃化，出苗率较高（87.64％）。1/2MB0.5、MB0.5愈伤组织为红绿色，生长能力比较强，亦不会导致褐化的现象，因此，出苗率也比较高（86.67%和85.07%）。胚的愈伤组织情况和出苗情况见图1～4。3结论1/2MS0培养基配方为1/2MS，

6、不加任何生长激素，而愈伤组织的诱导率高达100％。1/2MB0.2，MIZ等培养基生长激素含量较低，其诱导率大于80％。而其他培养基如1/2MB0.05，MB0.5，MBN0.05等，生长激素浓度偏高，则诱导率在60％～75％之间。在MBD、1/2MBN和MBN等培养基中的诱导率几乎为0，说明2，4－D及NAA这些激素的存在，并不适合愈伤组织的诱导，这与兰芹英［2］等的研究结果有所出入，其研究指出胚轴在1/2MBN的诱导率为54.17％，而在MBN中的诱导率为80％。在MIZ培养基中，添加了玉米素（ZT），愈伤组织诱导率高（89％），而且愈伤组织质地致密，颜色鲜绿

7、，出苗数多（87.64％）。在1/2MS0培养基中，诱导率虽然极高（100％），但其愈伤组织易褐化，而在1/2MB0.2培养基中愈伤组织则易玻璃化。1/2MB0.5，MB0.5及MB0.05培养基的出苗率虽然也比较高（＞70％），但是由于其愈伤组织的出愈率不高（＜75％），因此，也不是诱导白木香胚愈伤组织的理想培养基。而在其他培养基上形成的愈伤组织质地都较疏松，而且出苗的数量较少。综上所述，添加了玉米素（ZT）的MIZ培养基，从出愈率，愈伤组织的情况和出苗率来考察，是在本实验所采用的众多培养基中，效果最好，最适合用于白木香胚愈伤组织诱导的培养基。关于白木香的组织培

8、养，叶勤法