华北落叶松成熟合子胚不定芽诱导及伸长研究-论文.pdf

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1、中回基通握2014，30(16)：12—17ChineseAgriculturalScienceBulletin华北落叶松成熟合子胚不定芽诱导及伸长研究赵健，李旦，张金凤(‘林木育种国家工程实验室，林木花卉遗传育种教育部重点实验室，国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室，北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083；西南林业大学，云南生物多样性研究院，昆明650224)摘要：本研究以华北落叶松成熟合子胚为外植体，进行华北落叶松离体器官发生的初步探究。试验采用不同消毒方法对华北落叶松成熟合子胚进行消毒，设计了以6-BA、NAA及蔗糖为试验因素的3正交试验进行华北落叶松不定

2、芽的诱导研究，并且在不定芽伸长试验中添加了少量活性炭。试验结果表明，(1)将种子在用流水冲洗12h，75％酒精消毒3min，再转入0．1％升汞消毒10min所获得的综合效果较好；(2)光照条件下(约2000Ix)，DCR培养基+4meCL6．BA+0．1rngLNAA+40g／L蔗糖为诱导不定芽的最佳组合，其中6．BA影响作用显著，NAA、蔗糖则无显著影响；(3)1．0g／L活性炭对不定芽伸长有显著的促进作用，平均伸长达0．43cin。以上研究为华北落叶松组培器官发生及进一步的遗传转化研究奠定了良好的理论与实践基础。关键词：华北落叶松；成熟合子胚；外植体消毒；不定芽诱导与伸长中图

3、分类号：$718．46，Q943．1文献标志码：A论文编号：2013．3268AdventitiousBudsInductionandElongationfromMatureZygoticEmbryoofLnrixprincipis-rupprechtiiMayr．ZhaoJian，LiDan，ZhangJinfengrNationalEngineeringLaboratoryforTreeBreeding,KeyLaboratoryforGeneticsandBreedinginForestTreesandOrnamentalPlantsofMinistryofEducatio

4、n,TreeandOrnamentalPlantBreedingandBiotechnologyLaboratoryofStateForestryAdministration,CollegeofBiologicalScienceandBiotechnology，BeijingForestryUniversity，Beijing100083；2SouthwestForestryUnwersity,YunnanAcademyofBiodiversity，Kunming650224)Abstract：Inthisstudy，maturezygoticembryosofLadxprinc

5、ipis—rupprechtiiMayr．wasusedforapreliminaryinvestigationontheorganogenesisofLan~rprincipis—ruppreehtiiMayr．．Differentdisinfectionmethodswereutilizedtoprocesswiththeexplantsandanorthogonalexperimentdesignedwith6一BA．NAAandsucrosewasemployedtoinvestigatetheinductionofadventitiousbuds．Moreover，af

6、ewactivatedcarbonswereaddedtothemediumintheelongationphase．Theresultsshowedthat(1)theoptimaldisinfectionmethodwasthatafterrinsedinrunningwaterfor12hours，theseedsweresurfacedecontaminatedwith75％ethanolfor3minutesandthendisinfectedwith0．1％mercuricchloridesolutionfor10minutes；(2)Thebestcombinati

7、onofadventitiousbudsinductionwasDCRmediumsupplementedwith4mg／L6一BA．0．1mg／LNAAand40g／Lsucroseunderalightintensityof2000lx，inwhichNAAandsucrosewerenosignificanteffect；(3)1．0g／Lactivatedcarbonplayedapositiveroleinelongatingofadventitiousbuds，whi