华山松胚性组织悬浮培养特性及成熟能力的研究

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1、分类号：S722.3+7学校代码：10712UDC：630研究生学号：20130S0891密级：公开g农林令牧大学2015届全曰制硕士专业学位研究生学位论文华山松胚性组织悬浮培养特性及成熟能力的研究类型林业硕士领域、方向林木遗传育种研究生戎旭旭指导教师张存旭副教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的全日制颂士专业学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果

2、与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年6月I日导师指导研究生学位论文的承诺本人承诺：我的全日制硕士专业学位研究生呈交的硕士学位论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定

3、》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位论文使用授权的说明本学位论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位论文的全部或部分内容4受权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位论文及其相关的工作成果时，

4、将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人）未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任.(■休密的咩位论文在保密期限内，不得以任柯古夂岌表、梏阅、复印、縮印或扫描复制手段保存、汇编论文)研究生签名：时间：(月1日Classificationcode:S722.3+7Universitycode:

5、10712UDC:630Postgraduatenumber:2013050891Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sProfessionalDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015EmbryogenicsuspensionculturesofPinusarmandii.:growthcharacteristicsandmaturationabilityMajor:MasterofForestResearchfield:Foresttreegenetic

6、andbreedingNameofPostgraduate:RongxuxuAdviser:AssociateProf.ZhangCun-xuDateofsubmission:May,2015YanglingShaanxiChina华山松胚性悬浮培养特性及成熟能力的研究摘要华山松（PinusarmandiiFranch.）是我国西部山区的优良速生乡土针叶树种之一，也是南部高海拔地区重要的脂材两用树种，综合利用价值较高。华山松通常采用种子繁殖，但实生苗难以保持母树的优良性状；应用扦插、嫁接等常规无性繁殖方式繁殖困难。因此，开发新的无性

7、繁殖技术具有重要意义。本研究以华山松优良基因型未成熟合子胚为材料，诱导胚性愈伤组织，建立胚性细胞悬浮培养体系，并进行成熟培养的研究，为建立高效体胚再生植株系统奠定基础。主要研究结果如下：1.采用有胚乳和无胚乳两种接种方式接种华山松外植体，均可诱导出愈伤组织，其中有胚乳外植体的诱导率更高。在附加1.0mg/L2,4-D+1.0mg/L6-BA的mLV基本培养基上诱导率达27%，且愈伤组织有极少量淡黄色颗粒，较疏松，褐化现象不明显。2.由未成熟合子胚诱导的愈伤组织类型有两种：胚性和非胚性愈伤组织。胚性愈伤组织为半透明、浅白或白色、较疏松

8、。非胚性愈伤组织呈淡黄色或黄色，表面潮湿或结晶，结构紧致。用醋酸洋红和埃文斯蓝双染色技术进行染色，胚性细胞头部染成鲜红色，胚柄细胞染成蓝色；非胚性细胞被染成蓝色。3.华山松胚性细胞悬浮培养过程中，细胞鲜重增加值变化呈“S”形曲线，生长