不同基本培养基及激素对籼稻成熟胚愈伤组织诱导影响.doc

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1、不同基本培养基及激素对粕稻成熟胚愈伤组织诱导影响摘要:以川香29B、中9B、金23B和II一32B4种釉稻的成熟胚为外植体,研究MS、N6、NB和NMB4种基本培养基,2,4-D与KT或6-BA联合使用对籾稻愈伤组织诱导的影响。结果表明,4种粘稻在NMB基本培养基中愈伤组织的诱导率最高,平均诱导率为77.00%〜96.00%,其中在NMB中的诱导效果最好,在4种不同基本培养基中愈伤组织总平均诱导率的高低顺序依次为川香29B、中9B.II-32B、金23B。当3.0mg/L2,4-D与不同浓度的KT或6-BA联合使用时,KT浓度为0.1mg/L时,川香29B和中9E愈伤组织诱导率高;对于II

2、-32B,KT浓度为0.6mg/L愈伤组织诱导率较高;6-BA浓度为0.4mg/L时,川香29B愈伤组织诱导率最高;对于中9B和II-32B,添加0.1mg/L的6—BA最有利于愈伤组织的诱导;而对于金23B,无论是添加KT或6-BA都会抑制愈伤组织的诱导。关键词:和稻;愈伤组织诱导;培养基;激素中图分类号:S511.2+l;Q813.1+2文献标识码:A文章编号:0439-8114(2012)18-4121-04EffectsofDifferentBasa1MediumandPhytokininonCa11usInductionofIndicaRiceMatureEmbryosLIAOP

3、eng—feil,2,ZHAOJun—xing1,LEIFa—yangl,YUChao1,2,LIShao-bo2(1.TeachingCenterforExperimentalBiology/SchoolofLifeScienceandFoodEngineering,NanchangUniversity,Nanchang330031,China;2.KeyLaboratoryofMolecularBiologyandGeneEngineeringinJiangxiProvince,NanchangUniversity,Nanchang330031,China)Abstract:Effec

4、tsoffourbasalmedium(MS,N6,NBandNMB)andtwokindsofphytokinin(KT,6—BA)oncal1usinduetionfrommatureembryosoffourindicaricevarieties(Chuanxiang29B,Zhong9B,Jin23B,II—32B)wereinvestigated.TheresultsshowedthatthemostefficientbasalmediumwasNMBastheaveragecal1usinductionratesrangedfrom77.00%to96.00%・Theorder

5、ofaverageratefromhightolowwasChuanxiang29B,Zhong9B,II—32B,Jin23B・When3mg/L2,4—Dwasapp1iedwith0.1mg/LKTor0.4mg/L6—BA,theinductionrateofChuangxiang29Bwasthehighest.ForZhong9B,thecombinationof3mg/L2,4—Dwith0.1mg/LKTor0.1mg/L6—BAwasoptimum.ForII—32B,thecombinationof3mg/L2,4—Dwith0.6mg/LKTor0.1mg/L6—BA

6、wasoptimum.However,theca11usformationofJin23BwouIdbeinhibitedbyaddingeither6—BAorKT.Keywords:indicarice;ca11usinduction;basalmedium;phytokinin农杆菌介导的高效遗传转化体系已经在水稻外源基因转化中取得了很大的成功[1一3],利用该技术不仅可以把感兴趣的基因导入到水稻基因组中,进而培育优质、髙产、多抗的水稻新品种[4,5],而且也为水稻基因功能研究提供重要手段,如通过T—DNA插入构建突变体库、基因打靶等[6,7]o水稻胚性愈伤组织是农杆菌介导外源基因进

7、行遗传转化的良好受体,因此水稻愈伤组织的形成和状态是直接影响着水稻遗传转化效率的重要因素。粘稻和粳稻是栽培稻的两个主要亚种,粳稻的组织培养技术已经成熟,愈伤组织诱导容易,诱导出来的愈伤组织是胚性愈伤组织,生长速度快,再生率高,并且许多粳稻品种已建立了基于愈伤组织的重复性好、转化频率高的遗传转化体系[8,9]。而栽培面积占全球水稻80%的和稻却具有不良的组织培养特性,其诱导率和再生率都比粳稻低得多,后续继代过程中容易褐化,

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