多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定MolecularCloningandFunctionIdentificationofAdhesionProteinGeneFamilyfromTaeniamulticeps硕士研究生：岳龙指导教师：付宝权研究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：兰州兽医研究所研究生院2015年5月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宂成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包

2、含其俾人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以闬不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会

3、签名表论文题目多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定人兽共患病与兽论文作者岳龙专业兽医研宄方向医公共卫生学指导教师付宝权培养单位（研宄所）兰州兽医研宄所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评硕导s/臧荣盡教授西北民族大学预防兽医学博导口阅硕导口中国农业科学院兰州人贾万忠研宂员预防兽医学博导0兽医研宄所答辩主席硕导口景涛教授兰大医学院医学博导d硕导0杨孝朴教授甘肃农业大学预防兽医学博导口硕导0魏锁成教授西北民族大学预防兽医学博导口答硕导口刘光远研宄员兰州兽医研宄所预防兽医学博导sf4丨齡辩硕导口蔡建平研宂员兰州兽

4、医研究所预防兽医学博导0委硕导口朱启运研宄员兰州兽医研宄所预防兽医学博导0员硕导口刘永生研宄员兰州兽医研究所预防兽医学博导s(硕导口博导口会议记录（秘书）闫鸿斌论文答辩时间地点2015年5月13日于兰州兽医研宄所综合楼五楼会议室密级:论文编号:中国农业科学院学位论文多头带绦虫黏着蛋白家族基因克隆与功能鉴定MolecularCloningandFunctionIdentificationofAdhesionProteinGeneFamilyfromTaeniamulticeps硕士研究生：岳龙指导教师：付宝权研

5、究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：兰州兽医研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationMolecularCloningandFunctionIdentificationofAdhesionProteinGeneFamilyfromTaeniamulticepsM.S.Candidate：YUELongSupervisor：Prof.FUBaoquanDegree：MasterofVeter

6、inarianSpecialty：VeterinaryMay2015摘要脑多头蚴病（Cerebralcoenurosis）是由多头带绦虫（Taeniamulticeps）的中绦期幼虫脑多头蚴（Coenuruscerebralis）引起的一种人畜共患寄生虫病。脑多头蚴可寄生于牛、羊等家畜的脑、脊髓等中枢神经系统，使宿主产生神经症状，甚至导致死亡，人作为中间宿主亦可偶发脑多头蚴病。因此，该病不仅给畜牧业造成巨大的经济损失，而且威胁着人体健康。随着分子生物学和免疫学技术的发展，使用疫苗防治绦虫蚴病取得了一定的成效，

7、成为目前研究的热点。本研究以多头带绦虫基因组DNA为模板，PCR扩增TmAdh基因家族成员基因组序列，获得6个含有N端信号肽和1个FnIII结构域的基因序列。利用生物信息学软件对TmAdh家族成员进行预测分析，发现其都由3个外显子和2个内含子组成；序列比对显示其蛋白序列一致性在44.9-99.2%；进化分析发现该蛋白属于带科绦虫免疫保护性抗原家族的一个新的亚类。以脑多头蚴cDNA为模板扩增出TmAdh1、TmAdh2和TmAdh4cDNA基因片段，TmAdh3基因片段人工合成，将TmAdh1-4基因片段连接至

8、原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达。成功表达出产物大小约为39.0、38.1、38.9和37.8ku的重组蛋白。利用Western-blot分析TmAdh1-4重组蛋白的反应原性，结果表明脑多头蚴自然感染绵羊血清与TmAdh3重组蛋白反应明显，而与TmAdh1、TmAdh2和TmAdh4重组蛋白反应不明显。细胞黏着活性实验结果表明重组蛋白TmAdh1-4对中国仓鼠卵巢细胞（CHO）和正常鼠肾细