凝结芽孢杆菌培养基的优化及其制备工艺的研究

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2、指导教师：王斧营养■餅純飾种１欄姜輪如：动物科学与营弗过．Ｖ．＇．’－、；＇．Ｖ、巧Ｖ破：，；帥＞＇＂■■＾１／；＇ｉ：／Ａ7t~%--m~--uDC--'#-tx1-:1i!!;10496;Jf~t5f.J~~tiffJ%~~a'-J1JG1~&.~"*lJ~_r_z:s'-J~1t:OptimizationoffermentationmediumandpreparationtechnologyofBacilluscoagulans1~~11=~&-At----------=~~------.tlfl-

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4、导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已経发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得武汉控工大学或其它教育机构的学位或证书而使巧过的材料。对本文的研究做出重耍贡献的个人或集体巧已在文中作了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律责任和法律后果由本人承担。Ｓ＿－论义作者签名：易柔签字日期：记巧年Ａ月曰＾论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解武汉控工大学有关保留、使用学位论文的规定，特授权武汉轻工大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数

5、据库进行检禁，并采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编，供查阅和借阅。同意学校向国家有关部口或机构送交论文的复本和电子文件。（保密的学位论义在解密后适巧本授权说明），－ｉ－论文作者签名：爲粟导师签名：：；日签字日期签宇日期么６年５月：＾ｆ摘要本文对本实验室所保藏的一株具有耐高温、耐酸、耐胆盐能力，且已被证明能提高仔猪生长性能的凝结芽孢杆菌BCRC11592的工业生产条件进行研究。首先对其工业培养基成分、接种种龄和发酵培养基装液量进行优化，并在较系统的培养基和发酵条件的基础上，利用全自动液体发酵罐进行小

6、试生产试验，分析发酵罐的机械搅拌速度、通气量和pH恒定等条件对菌体生长和芽孢形成的影响，确定最佳发酵工艺条件；再对发酵液进行浓缩、吸附制备凝结芽孢杆菌粉制剂。此后，对该产品进行体外模拟制粒温度、体外消化、药敏试验和产品贮存试验，对产品性能指标进行初步评判。为凝结芽孢杆菌制剂的开发和工业生产提供一定的理论依据和数据基础。试验一凝结芽孢杆菌工业培养基的优化将保藏的凝结芽孢杆菌BCRC11592的菌种进行活化后，以菌种数和芽孢数为测定指标，以接种种龄、碳源、氮源和无机盐为因素进行单因素试验，在此基础上，再利用正交设计原理以两种碳源比例、两种氮

7、源比例、碳氮比和培养基物质总量为因素，选择四因素三水平的正交试验，对这种复合培养基再进行进一步优化，最后确定实验室中的最适装液量。优化后的培养基组成为：玉米粉5g/L，豆粕7.5g/L，NH4Cl7.5g/L，麸皮10g/L，K2HPO4•3H2O1g/L，MnSO4•H2O0.3g/L。在前期试验中已经优化过的发酵培养条件下，此种培养基的发酵液菌种数可以达到2.20×109cfu/mL，芽孢数为2.02×109cfu/mL。试验二凝结芽孢杆菌制剂的制备工艺前期优化过的培养基首先经蒸煮、过滤制成适合液体发酵罐的培养基，将发酵罐和加入的培

8、养基共同灭菌处理后，添加1%的菌体种子液完成接种。选取单因素实验方式对发酵罐的机械搅拌速度和通气量进行优化，最适搅拌速度为200r/min，最适通气量为350L/h，发酵过程中不需要保持pH恒定。发酵完成的