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《凝结芽孢杆菌bacilluscoagulans之研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)之研究指導老師:李國陽二技生技四甲專題學生18843049陳樹惠18843044楊春滿摘要:乳酸菌可以降低腸胃道中之PH值,而達到抑制腸內腐敗菌及致病菌之生長,同時它亦可能產生多種抗菌物質可以殺死腸道中之壞菌.正由於乳酸菌具有這些優秀之功能,因此篩選出優良的乳酸菌種是我們研究重點.根據顯示研究孢子本身具有耐酸性,耐高溫性,及高度貯存安定性,而凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)為其少數可產生孢子之乳酸菌種之一.本研究探討凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)的最佳生長環境及最佳產孢的溫度,並測其孢
2、子的耐受性,實驗中改變不同的液態培養基之配方(氮源,碳源…)與培養條件(PH值及溫度),發現PH6.8溫度36.5℃是較適菌種的生存環境,而利用不同的溫度尋求最適孢溫度,結果顯示45℃為最佳產孢溫度.壹.前言:發酵食品中所使用之微生物包括黴菌(mold),酵母菌(yeast)及乳酸菌(lacticacidbacteria)等,其中以乳酸菌為最被廣為應用之一群,而乳酸菌通常是泛指能夠發酵碳水化合物,以產生乳酸為主要產物之微生物,乳酸菌在多數動物消化道中為優勢菌,細胞較大,通常以成隻或成串出現;少數具有芽胞及莢膜,能在很廣圍的溫度(15℃~45℃)中生長,而最適宜的溫度為37
3、℃;其最適宜PH值則為5.8在左右.乳酸菌用於發酵食品一方面除了能夠賦予食品增加風味,增加食品的營養價值外,另一方面其具有抑制腸道中有害微生物的生長,調節及建立腸道內菌相外,其還具有治療腸內不適所引起之腹瀉,降低血中膽固醇,並且改善乳糖不耐症以及抑制致癌因子及癌細胞等等療效,就因乳酸菌具有這些優點的存在,因而乳酸菌至今才會被世界各地延用多年.雖然在市面上利用乳酸菌所製造出的產品十分眾多,例如優酪乳(統一AB優酪乳,光泉晶球優酪乳…等),優格,起司,乳酪,三共胃腸藥,表非明,泡菜….等等相關的產品.但在這些產品之中能夠真正在人體中發生其作用的乳酸菌之菌種十分的少,其主要原因
4、乃是人體的胃酸值介於PH值2~3之間,而使得許多乳酸菌種根本無法在此低PH值之下生存,所以市面上有的產品的確有很強之健胃整腸的效果,但有的產品其功能卻令人十分的值得懷疑.根據許多文獻中記載中孢子本身具有高度的耐酸性,耐高溫性,及高度貯存安定性,但乳酸菌中會產生孢子的菌種卻十分的少見,而其中凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)就是其中一種會產生孢子之乳酸菌菌種.單位藥品Glucose的改變Peptone的改變g/Lg/LGlucose10155101010Peptone55557.52.5酵母萃取物333333Maltoseextract333333PH6.8
5、6.86.86.86.86.8貳.材料與方法:一.藥品:1.crystalviolet2.iodinesolution3.乙醇4.safranin5.液態培養基:單位藥品酵母萃取物的改變Maltoseextrac的改變g/Lg/LGlucose101010101010Peptone555555酵母萃取物34.51.5333Maltoseextract33334.51.5PH6.86.86.86.86.86.86.固態培養基(BCP)Glucose1g/L酵母萃取物3g/LBromocresolpurple0.04g/LL-Cystein0.2g/LPeptone5g/LA
6、gar15g/LTween801㏄/LPH77.0.1M磷酸鹽緩衝溶液(PhosphateBufferedSaline;PBS)組成份為disodiumhydrogenphosphate1.2g/L;monosodiumdihydrogenphosphate0.22g/L;sodiumchloride8.5g/L,PH值則以0.1N磷酸調整之.8.菌種來源由李順來老師提供.二.設備:無菌操作台恆溫箱高速離心機烘箱高壓蒸氣滅菌釜位相差顯微鏡三.方法:實驗流程表菌種特性分析測試凝結芽孢桿菌對於溫度及PH值生長性找出凝結芽孢桿菌的最適溫度及PH值尋求凝結芽孢桿菌最適之培養基尋求
7、凝結芽孢桿菌最佳產孢溫度孢子對於溫度及PH之耐受性測試表一(一).菌種特性分析染蘭氏染色及鏡檢:1.菌體以接種環塗抹固定載玻片上.2.先以數滴crystalviolet染色30秒後,用水洗去染料.3.再加數滴iodinesolution固定crystalviolet30秒後,用95%乙醇沖洗,直到流下之乙醇不呈藍色為止.4.再用數滴safranin染色30秒.5.用水洗去染料並用紙吸乾殘餘水分,風乾.6.用顯微鏡放大觀察結果格蘭氏染色陽性為紫藍.7.因時間因素學妹將繼續以BioLog作初步鑑定工作.(二)凝結芽孢菌對於不同溫度
