三七毛状根的诱导及液体培养技术

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6、技术英文题目：InductionandLiquidCultureofPanaxnotoginsengHairyRoots学科名称：生物学隶属学院：生物工程学院研究生：潘妍指导教师：张宗申教授2015年5月摘要摘要三七（Panaxnotoginseng（Burk.）F．H．Chen），是我国特有的民族中草药，五加科人参属珍稀濒危药用植物。利用三七的再生植株外植体，通过发根农杆菌的侵染，诱导三七产生毛状根。毛状根具有激素自养、生长速度快、遗传稳定、次生代谢产物积累能力强等优点，建立三七毛状根诱导和液

7、体培养技术体系，对于后续通过细胞工程技术手段解决三七资源问题具有重要意义。首先以三七的愈伤组织为材料，研究了不同的抗氧化剂等对愈伤组织褐变及生长的影响；优化激素配比，建立通过愈伤组织分化途径的三七再生植株的培养体系；以三七的再生植株为外植体，利用不同的发根农杆菌来诱导产生毛状根。研究结果如下：1.以细胞干重为指标，筛选2，4-D和6-BA的最优配比组合，优化三七愈伤组织生长的培养基配方。结果表明,愈伤组织在培养基为MS+2，4-D1.0mg/L+6-BA0.2mg/L时其增殖最快，而在培养基为M

8、S+2，4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L时，愈伤组织最易成为颗粒状的愈伤组织。2.抗氧化剂对愈伤组织褐变的抑制及生长的影响。结果表明，抗氧化剂处理对非褐变愈伤组织的生长有抑制作用；与柠檬酸相比，抗坏血酸在预防和抑制愈伤组织褐化中的效果更好；但是柠檬酸对愈伤组织中皂苷含量的影响更大。3.pH对两种愈伤组织的影响，结果发现两种愈伤组织培养的最佳pH均为5.6。4.不同的培养周期对愈伤组织的影响，结果发现不同的培养周期对愈伤组织的增殖和褐化的影响不大，综合来说其最佳的培养周期为21天。5.