拟胚体的状态对小鼠胚胎干细胞神经诱导效率的影响

《拟胚体的状态对小鼠胚胎干细胞神经诱导效率的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、上海交通大学工程硕士专业学位论文拟胚体的状态对小鼠胚胎干细胞神经诱导效率的影响学校：上海交通大学院系：生命科学技术学院班级：Z1308021学号：1130802009工程硕士生：周桢宁工程领域：生物工程导师：李志勇丁小燕答辩日期：2015年5月24日上海交通大学生命科学技术学院2014年03月31日1上海交通大学工程硕士论文2上海交通大学工程硕士论文3上海交通大学工程硕士论文摘要小鼠胚胎干细胞是指由小鼠早期胚胎内细胞团分离并建系的多能干细胞。小鼠胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能。在体外环境中，小鼠胚胎干细胞不仅能自发分化为外胚层、中胚层以及内胚层细胞，还能在含有特殊细胞因子和化

2、学药物的环境中定向诱导分化。由于神经细胞具有不可再生性，因此多年来小鼠胚胎干细胞神经诱导一直是研究较热的一个方向。目前，大多数小鼠胚胎干细胞神经诱导方法还是基于悬浮法形成EBs的分化系统。然而，小鼠胚胎干细胞悬浮法形成的EBs具有形成EBs大小随机以及形成EBs密度随机的缺陷，进而影响神经诱导的效率，最终使得实验可重复性变差。为了尽量缩小小鼠胚胎干细胞向神经诱导分化的实验差异，以便于利用该系统做进一步的神经发育相关研究以及药物筛选，本实验基于Watanabe和Kondo研发的神经诱导方法，采用悬滴法形成的EBs针对EBs的大小以及EBs的密度对神经诱导效率的影响进行了研究，并最终确

3、定了神经诱导效率较高的EBs直径和EBs密度，从而优化了小鼠胚胎干细胞神经诱导方法。关键词：小鼠胚胎干细胞，拟胚体，神经诱导，方法优化4上海交通大学工程硕士论文THEEFFECTOFEMBRYOIDBODYSTATEONTHENEURALINDUCTIONBYMOUSEEMBRYONICSTEMCELLSABSTRACTEmbryonicstemcellscanintheoryproduceallcelltypesofalivingorganismwhilerenewingthemselveswithastablegeneticbackground.Theseuniquefeatu

4、resmakeembryonicstemcellsafavorabletoolforbiomedicalresearchesaswellasapotentialsourcefortherapeuticapplication.Invitro,mouseembryonicstemcellscannotonlyspontaneouslydifferentiateintoectoderm,mesodermandendoderm,butalsodirectlydifferentiateintheenvironmentwhichcontainsspecialcytokineandchemica

5、lmolecules.Afterdecadesofdevelopment,theformationofneuralcelllineagesfromembryonicstemcellshasbeenwellestablished.Atpresent,themajorityofprotocolsfornerveinductionthroughembryoidbodies(EBs)formationarebasedonthesuspensionmethod.However,theformationofEBswithsuspensionmethodhasdefectsinrandomEBs

6、sizeandnumberwhichwillaffecttheefficiencyofneuralinductionandeventuallyhavepoorreplicabilities.Inthisstudy,wecarefullycontrolledthecultureconditionsforEBsformation,anddiscussedthefactorsthatinfluencetheneuralinductionefficiency.5上海交通大学工程硕士论文KEYWORDS:mouseembryonicstemcells,embryoidbodies,neura

7、linduction,optimizationprotocols6上海交通大学工程硕士论文目录第一部分引言………………………………………………………………1一、哺乳动物早期胚胎神经发育简介…………………………………1二、胚胎干细胞体外分化为神经细胞…………………………………21、小鼠ESCs自发分化为神经细胞…………………………………….32、化合物诱导ESCs分化为神经细胞………………………………….53、ESCs分化细胞的筛选……………………………………………….