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《抑制前列腺癌notch通路增强多烯紫杉醇化疗敏感性的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、单位代码：10248学号：0127249274上海交通大学博士研究生学位论文抑制前列腺癌Notch通路增强多烯紫杉醇化疗敏感性的实验研究研究生姓名：崔迪指导老师：夏术阶教授学科（专业）：外科学（泌尿外科）研究方向：前列腺疾病培养单位：上海交通大学附属第一人民医院申请学位：博士学位完成日期：2015年4月ISHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYDoctoralDissertationNotchpathwayinhibitionusingPF-03084014,aγ-secretaseinhibitor(G
2、SI),enhancestheanti-tumoreffectofdocetaxelinprostatecancerCandidate:CuiDiSpecialty:UrologySupervisor:Prof.XiaShujieDegreeApplication:Ph.DEducatingUnit:TheFirstPeople’sHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaoTongUniversityCompletedDate：April,2015III上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明
3、：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：2015年4月21日V上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全
4、部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□√。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：2015年4 月21 日日期：2015年4 月21 日VII上海交通大学博士研究生毕业论文抑制前列腺癌Notch通路增强多烯紫杉醇化疗敏感性的实验研究摘要目的:评估γ分泌酶抑制剂PF-03084014对去势抵抗性前列腺癌细胞Notch信号通路的抑制作用，观察癌细胞对多烯紫杉醇化疗的敏感性改变，并进一步探索P
5、F-03084014提高多烯紫杉醇化疗敏感度的分子机制。方法：（1）体外实验：利用人前列腺癌细胞系DU145和PC3，多烯紫杉醇抵抗型DU145R和PC3R细胞，分别用DMSO、PF-03084014、多烯紫杉醇、多烯紫杉醇+PF-03084014孵育，测定细胞存活和NICD的表达。（2）体内实验：建立软组织和骨转移灶前列腺癌小鼠模型，当肿瘤体积达到基线后，随机分为四组，进行以下处理：对照、口服PF-03084014、注射多烯紫杉醇、PF-03084014+多烯紫杉醇联合治疗。每周两次评估肿瘤的生长情况。待处理周期结
6、束后，获取肿瘤组织。免疫组化定量测定肿瘤组织中Ki67，cleaved-caspase3和CD31的表达。PCR测定组织中HEY1和HEY2mRNA的表达。Westernblot方法来测定NICD,CyclinE,BCL-2,BCL-xl,BAK,BAX,MEK1/2,phosphor-MEK1/2(ser217/221),ERK1/2,phosphor-ERK1/2(T202/Y204),AKT,phosphor-AKT(ser473),PI3K,phosphor-PI3K(tyr455/199),EGFR,P52
7、，E-cadherin,Snail,Slug,MDR1,NANOG的表达。流式细胞计数测定组织细胞中ALDH的表达，无血清培养基下测定组织细胞悬浮成球能力。结果：（1）体外实验：PF-03084014抑制前列腺癌DU145，PC3和DU145R，PC3R细胞的生长和NICD的表达，并成浓度和时间依赖性。PF-03084014增强DU145R，PC3R对多烯紫杉醇的敏感度。（2）在多烯紫杉醇敏感型细胞皮下成瘤模型中，单独使用PF-03084014使DU145肿瘤的生长降低39.7％，PC3肿瘤降低28.9％；多烯紫杉醇
8、处理组中，DU145肿瘤体积缩小36.1％，PC3缩小38.5％；而联合用药组DU145和PC3IX上海交通大学博士研究生毕业论文肿瘤体积分别降低了64.1％和56.6％。而四种不同处理组中小鼠体重并没有显著的差异（P=0.5786）。对于耐药型细胞皮下成瘤模型，单独使用PF-03084014使DU145R和PC3R分别下降45％和35％。而高
