多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因的检测及其与可移动遗传元件的相关性研究

《多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因的检测及其与可移动遗传元件的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：密级：UDC：学号：416523112095南昌大学硕士研究生学位论文多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因的检测及其与可移动遗传元件的相关性研究Prevalenceofplasmid-mediatedquinoloneresistancedeterminantsandtheassociationwithmobilegeneticelementsinthemulti-drugresistanceKlebsiellapneumoniae徐群飞培养单位（院、系）：公共卫生学院指导教师姓名、职称：万腊根教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称

2、：临床检验诊断学论文答辩日期：答辩委员会主席：学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机

3、构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密

4、（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：1.了解南昌大学第一附属医院2012年～2013年间临床分离多重耐药肺炎克雷伯菌的分布情况及耐药特性，为临床抗菌药物选择提供依据。2.研究2012年～2013年多重耐药肺炎克雷伯菌临床连续分离株中质粒介导喹诺酮类耐药基因的分布和特性。3.研究质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因与移动基因元件携带率的相关性，并分析其与不同抗菌药物耐药性的关系。方法：1.收集南昌大学第一附属医院临床标本中分离的多重耐药肺炎克雷伯菌40株，采用最低抑菌浓度（MIC）法测定抗菌药物对细菌的敏感性，药敏结果按照美国临床和实验

5、室标准协会（CLSI）2012推荐标准进行判读。2.采用PCR法检测质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因（PMQR），包括qnr基因、药物外排泵蛋白qepA和氨基糖苷乙酰转移酶的变异基因aac(6’)-Ib-cr,阳性结果测序，测序结果在Genbank比对。对PMQR基因阳性菌株进行接合转移试验。ERIC-PCR及MLST分析是否克隆传播。3.PCR扩增部分可移动遗传元件遗传元件（插入序列IS26、IS2、ISCR1、ISEcp1，整合子intI1、intI2、intI3）。经琼脂糖凝胶电泳，检出的阳性基因测序并比对；PCR-mapping对移动元件下游是否携

6、带PMQR基因进行检测，研究分析它们之间的相关性。结果：1.本研究共收集2012年～2013年多重耐药肺炎克雷伯菌40株，药敏结果显示耐药率最高的是氨苄西林，耐药率为100%；而头孢唑啉，头孢他啶，头孢曲松，氨曲南，厄他培南，庆大霉素的耐药率为80%～97.5%；亚胺培南的耐药率为77.5%；耐药率最低的是左氧氟沙星，但也达到了55%。ERIC-PCR及MLST结果显示，存在多个克隆株，主要为ST11/A型，但也存在ST340/A型、ST437/AII摘要型及ST147/J型等克隆株。2.40株多重耐药肺炎克雷伯菌中，其中有37株（92.5%）检测出含

7、有qnr基因的阳性菌株，qnrA共33株，均为qnrA1型；qnrB共12株，均为qnrB4型；qnrS共16株，均为qnrS1型，并且有4株同时携带三种以上qnr基因，qnrC、qnrD和qepA基因本次实验均未检出，另外检测出含aac(6’)-Ib基因28株，测序比对分析发现12株为aac(6’)-Ib-cr基因；40株PMQR基因阳性菌株中，接合转移试验成功8株，接合子与受体菌相比，对氟喹诺酮类药物的MIC值提高了2～32倍，部分或全部qnr基因转移到接合子上。3.40株肺炎克雷伯菌中，检出ISCR1基因阳性30株，检出ISEcp1基因阳性40株

8、，整合子intl1阳性32株，检出IS2基因阳性16株，检出IS26基因阳性10株；PCR-m