肺炎克雷伯菌的耐药基因序

肺炎克雷伯菌的耐药基因序

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1、产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析摘要:目的研究大庆地区产超广谱β-内酰胺(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌的基因型分布及序列变化。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增对分离14株耐药性强的产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株的TEM型、SHV型、CTX-M1型、CTX-M2型、CTX-M8型、CTX-M9型、OXA型ESBLS基因,1%琼脂糖凝胶电泳,回收DNA片段,测序分析各基因型在耐药的产超光谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株中的分布

2、。结果TEM-1、SHV-1、CTX-M-1基因扩增阳性数分别为4、4、7、4、2。结论分离的ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌存在多个耐药基因。关键词:超广谱β-内酰胺酶;肺炎克雷伯菌;耐药性;基因型SequencinganalysisofdrugresistancegeneofESBL-producingKlebsiellapneumoniaeAbstract:ObjectiveToinvestigatethegeneticdistibutionofextended-spectrumβ-lactam

3、ases-(ESBLs)producingKlebsiellapneumoniaeinDaqingCity.MethodsThegenotypesofTEM,SHV,CTX-M-1ESBLsgeneofESBL-producingKlebsiellapneumoniaeisolatedfrominpatientsinDaqingoilfieldgeneralhospitalwereamplifiedbyusingPCRandtheDNAfragmentswererecoveredafterelec

4、trophoresiswith1%aglucosegel.ThenseqquenceanalysiswasconductedforinvestigatingthedistributionofdrugresistantgeneticstrainsofKlebsiellapneumoniae.ResultsThepositiveratesofgenotypesofTEM,SHV,CTX-M-1ESBLsgenewere58.0%,90.3%,16.1%,respectively.ConclusionT

5、hereareseveraldrugresistantgenotypesintheisolatedESBLs–producingKlebsiellapneumoniae.Keywords:ESBLs;Klebsiellapneumoniae;Drugresistance;Genotype超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)主要分布于医院环境中,其基因多编码于可移动的质粒中,并由质粒介导的能赋予细菌对青霉素类、头孢菌素类、单环B2内酰胺类药物耐药的一类酶,产ESBLs的细菌有较高的交叉耐药和多重耐药性特

6、点[1]。ESBLs的编码基因可随质粒在同种或不同种革兰氏阴性细菌间传递,对临床就诊和住院病例构成危害。迄今为止已发现ESBLs200多种,主要为TEM型,SHV型,CTX-M型和OXA型,PER、VEB、GES、BES等少见类型也在增加[2]。TEM及SHV型ESBLslocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemaster

7、s(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame通常编码TEM-1和TEM-2和SHV-1的结构基因突变,导致酶活性中心附近的氨基酸残基被其他氨基酸或衍生物取代。由于各地区使用抗菌素种类及剂量不尽相同,因此对本地区产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌基因型开展研究,及时准确检ESBLs,对防止ESBLs流行、控制医院内感染和指导临床治疗有着非常重要的意义。为此,我们对大庆油田总医

8、院2009年分离的16株耐药性强的产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型进行研究。1材料与方法1.1菌株的来源2009年1月~2009年12月大庆油田总医院住院患者痰、尿、血液、胸腹腔积液和各种创面分泌物中分离耐药性强的产ESBLs肺炎克雷伯菌14株。1.2试剂及仪器DNA分子量Marker(DL2,000TMDNAmarker)、dNTP、TaqDNA聚合酶、PCR离心管购自TaKaRa公司;Tris,琼脂糖(BBI公司);PCR扩增仪(BIO-RADC1000TMThermocycl

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