外源性一氧化氮诱导胃癌sgc-7901细胞凋亡的作用

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1、分类号：R4单位代码：10752密级：公开学号：201200120宁夏医科大学硕士研究生学位论文外源性一氧化氮诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用ExogenousnitricoxideinducedgastriccancerSGC-7901cellapoptosis学位申请人：范丽丽指导教师：李伟华申请学位门类级别：医学硕士专业名称：临床检验诊断学研究方向：临床生物化学及分子生物学所在学院：检验学院论文完成日期：二〇一五年三月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisf

2、orApplicationofMaster’sDegreeExogenousnitricoxideinducedgastriccancerSGC-7901cellapoptosisStudent’sName:FanLiliSupervisor:LiWeihuaProfessorSubjectCategory:MedicineMajor:LaboratorymedicineSpecialty:ClinicalbiochemistryandMolecµlabiologySchool:NingxiaMedicalUn

3、iversityCompletionDate:Mar.2015GraduateDepartmentofNingxiaMedicalUniversity宁夏医科大学硕士学位论文中文摘要外源性NO诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用摘要目的探讨外源性一氧化氮（nitricoxide,NO）诱导中分化胃癌（SGC-7901）细胞株凋亡的作用。方法采用不同浓度的外源性NO供体------硝普钠（sodiumnitroprusside,SNP）处理人中分化胃癌细胞，MTT法检测胃癌细胞的存活率及细胞活力；荧光倒置显微镜

4、检测细胞的凋亡形态及细胞凋亡率。依据有无活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）抑制剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）和SNP作用细胞，实验设计分四组：Control组、NAC组、SNP组、NAC+SNP组。标准曲线法测定各组细胞中NO的产量；采用荧光化学发光分析仪检测细胞内ROS水平变化；流式细胞分析仪检测胃癌细胞的凋亡；Westernblot检测铜锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn-superoxidedismutase,Cu/Zn-SOD）蛋白的表达。所有数

5、据采用SPSS17.0分析。结果（1）外源性一氧化氮对胃癌SGC-7901细胞有抑制作用，且其抑制作用对外源性NO有着浓度依赖性及时间依赖性（P<0.05）。（2）外源性一氧化氮可诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡发生（P<0.05）。（3）NAC组和Control组在检测细胞的凋亡率及胞内ROS水平变化上的差异无统计学意义（P>0.05）；较Control组，单独SNP处理细胞可使细胞凋亡率及胞内ROS水平明显升高（P<0.05）；而经NAC干预后，SNP引起的细胞凋亡率和胞内ROS水平均下降（P<0.05）

6、，但仍高于Control组。得出：外源性一氧化氮可引起胃癌SGC-7901细胞内ROS的水平上调，进而引起细胞凋亡的发生。（4）外源性一氧化氮可引起细胞Cu/Zn-SOD蛋白表达的降低（P<0.05）。结论外源性NO可通过上调其胃癌细胞内ROS的水平，进而降低胞内铜/锌-过氧化物歧化酶（Cu/Zn-SOD）蛋白的表达量，而升高的ROS参与了外源性NO诱I宁夏医科大学硕士学位论文中文摘要导的胃癌细胞凋亡途径。关键词胃癌，外源一氧化氮，细胞凋亡，活性氧II宁夏医科大学硕士学位论文英文摘要Exogenousnitri

7、coxideinducedgastriccancerSGC-7901cellapoptosisABSTRACTObjectiveToinvestigatethepotentialaffectofexogenousnitricoxide(NO)inducedapoptosisofmoderatelydifferentiatedgastriccancercell(SGC-7901).MethodCellsweretreatedbydifferentconcentrationsofsodiumnitroprussid

8、e(SNP),whichactasexogenousNO.ThesurvivalateofcellsweredetectedbyMTTassay.Thestudywasdividedintofourgroups:blankcontrolgroup,reactiveoxygenspecies(ROS)inhibitors(N-acetyl-L-cysteine,NAC)group,SNP