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《二氢杨梅素对非小细胞肺癌a549细胞体外抗肿瘤作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、授予单位代码10089学号或申请号13090HebeiMedicalUniversity硕士学位论文在职科学学位二氢杨梅素对非小细胞肺癌A549细胞体外抗肿瘤作用研究学位申请人：孙大永导师：刘明教授专业：肿瘤学二级学院；第三医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、
2、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名:Mv/�‘导师签章^^二级学院领导盖章：河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。•研究生签名:r导师签章^日目录中文摘要………………………………………………………….…………1英文摘要…………………………………………………………….………4英文缩写…………………………………………
3、………………….………8研究论文二氢杨梅素对非小细胞肺癌A549细胞体外抗肿瘤作用研究前言…………………………………………………………………….10材料和方法……………………………………………….……………10结果……………………………………………………………………19附图……………………………………………………………………22附表……………………………………………………………………30讨论…………………….………………………………………………31结论………………….………………………………………………36参考文献…………………………
4、…..………………………………37综述放射治疗增敏研究进展……………….……………………………41致谢…………………………………………………………………………48个人简历…………………………………………………….………………47中文摘要二氢杨梅素对非小细胞肺癌A549细胞体外抗肿瘤作用研究摘要目的：肺癌是人类发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,放射治疗是其重要的治疗手段之一。但是放疗带来的正常组织损伤也很重,放射治疗后部分恶性肿瘤细胞还会出现不同程度的治疗抵抗。因此寻找低毒高效的抗肿瘤新药和放疗增敏剂迫在眉睫。二氢杨梅素(dihydromy
5、ricetin,DMY)是近几年新发现的一个黄酮类化合物,有研究显示DMY在体内外均能发挥抗肿瘤作用,并且低毒高效,同时还有保护肝脏、降血脂、抗氧化、提高免疫力等优点,另外也有大量研究表明黄酮类化合物存在放疗增敏的作用。那么作为黄酮类化合物的DMY很有可能会成为一种低毒高效的抗肿瘤药物和肿瘤放疗增敏剂,为肺癌的治疗提供新思路,同时也为我国天然植物药物在抗癌方面的开发应用提供进一步资料。方法：1体外培养A549细胞,并稳定传代,取对数期细胞进行实验。2取对数生长期细胞制备单细胞悬液,按照5000个每孔的数量接种于96孔板,孵育24h后,
6、当细胞贴壁良好,约30%-40%密度时,分别换成含不同浓度(0、20、40、60、80、100、140、200μg/ml)DMY的培养基继续孵育,48h后采用MTT比色法检测不同DMY浓度组A549细胞的增殖活力,计算得出IC50。3按照5000个每孔的数目接种细胞于96孔板,并用不同浓度(0、20、40、60、80、140μg/ml)DMY作用培养48h后,于倒置显微镜下检测和观察不同浓度DMY对细胞形态和生长状态的影响。333334按照不同的初始接种密度（1×10、5×10、10×10、50×10、100×10、3500×10个每
7、孔）将细胞分别接种到6孔板中培养24h,当细胞贴壁伸展良好时,并换成含40μg/mlDMY的完全培养基继续孵育,48h后取出于倒置显微镜下观察相同浓度DMY对不同接种密度细胞的作用,并拍照记录。5按照400个/孔的数量将细胞接种于6孔板中培养,24h后当细胞贴壁伸展良好时,分别用不同浓度(0、6、7、8、9、10、12、15μg/ml)的DMY作用48h后继续培养,观察克隆形成情况,检测DMY对于A549细胞的长1中文摘要期抑制作用,并计算得出细胞存活分数和IC50。6流式细胞术凋亡试剂盒检测不同浓度(0、20、40、80μg/ml)
8、DMY作用48h后对A549细胞的诱导凋亡作用。7WesternBlotting检测不同浓度(0、20、40、80μg/ml)DMY作用A549细胞48h后凋亡通路Bax和Bcl-2蛋白表达。8流式细胞术检测IC20浓度
