丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤自噬的影响及其机制研究

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1、分类号Ｒ４密级公开ＵＤＣ６１０编号１０５５５硕ｉ学位论文（专业学位）了苯助对大鼠脑缺血再灌注损伤自隨的影响及臭机制研究研究生姓名；曾维军－－指导教师姓名、职称：周文胜教授．；：学科、专业名称：临床医学研究方向：神经病学所在学院：湖南省老年医院二零一五年五月＠論孝４掌ＵＮＩＮＡＩＶ巨ＲＳＩＴＹＯＦｓｏｕ下ＨＣＨ了巧駄对大鼠脑缺血再灌注损伤自隧的影响及莫机制研究论文作者签名：皆解指导教师签名：论文评阅人１；卢伟二医，副教授，硕导，中南大学湘雅院评阅人２；夏健，副教授，硕导，

2、小南大学湘雅医学院二，，，中南大学湘雅医院答辩委员会主席：胡治平教授博导一医院；游咏委员１，教授．硕导，南华大学附属第委员２：杨期明，教授，硕导，湖南省老年医院一－３，，湖南省第人民睦院委员：黄晓松，教授硕导．＿＿委员４：杨剑义，副教暢，硕导，湖南省老年医院答辩日期：２０１５年５月２０日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进斤的研究工作及取得的研究成果，。尽我所知除了论文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使

3、用过的材料。与我共同工作的同志对本硏巧所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。木人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：知少年ｊｒ月＾喉得南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南化大学攻读硕（博／硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华火学所有，本论义的研究内容不得其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规，即定；学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅Ｗ公布；学校可学位论文的全部或部分内容，可Ｗ采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规

4、定送交学位论文。同窓学校将论文加入《中国优秀博硕丄学位论文全文数损库》，并按《中国优秀博硕±学位论义全义数据库出版章程》规化享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密厄适用该授权。作者签名：句巧哥师签名：苗。（年６月八口中文摘要丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤自噬的影响及其机制研究中文摘要目的：通过丁苯酞、SP600125（JNK的特异性抑制剂）对缺血再灌注大鼠模型进行干预，借助Westernblot、HE染色、TUNEL、透射电镜等实验方法

5、，探讨丁苯酞对缺血再灌注损伤后自噬的影响及其与自噬相关蛋白Beclin-1，LC3-Ⅱ的变化；JNK3信号通路是否参与缺血再灌注损伤中自噬的调控；丁苯酞对自噬的影响是否通过JNK3信号通路来调控的。方法：将100只（250-300）g健康雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组、模型组、丁苯酞干预组、SP600125组、丁苯酞+SP600125组。每组20只大鼠。丁苯酞组及丁苯酞+SP600125组于造模前一星-1-1期开始每天给予8mg·mL的NBP溶液1mL·100g灌胃；假手术-1组、SP600125组、模型组给予单纯麻油1mL·100g。同时SP600125-1组及丁苯

6、酞+SP600125组予以SP600125与40%PEG400配成1mg·mL-1溶液1mL·100g腹腔注射给药。假手术组、模型组、丁苯酞组予-1以同等剂量（40%PEG400）1mL·100g腹腔注射。Longa线栓法制作大鼠MCAO模型缺血2小时再灌注12小时。使用Longa评分法评价神经功能缺损；分别采用TTC染色判断缺血再灌注模型是否成功；HE染色检测脑组织病理变化；血清NSE含量评估脑缺血再灌注损伤后脑功能的损害；原位末端脱氧核昔酸转移酶标记法（TUNEL）检测缺血再灌注损伤后CA1区神经细胞凋亡与坏死；通过透射电镜观察缺血再灌注损伤后CA1区神经细胞内自噬体

7、形态、数量；WesternI南华大学硕士学位论文Blot检测大鼠CA1区自噬相关蛋白Beclin-1，LC3-Ⅱ的表达和JNK3信号通路相关蛋白JNK3，p-JNK的表达。结果：1.Longa评分：(1)首次评分:假手术组未见神经功能缺损症状。模型组（2.00±0.82）较假手术组（0）明显升高,差异有统计学意义（p<0.05）；NBP治疗组（1.83±0.50）、SP600125组（1.88±0.52）及NBP+SP600125组（1.85±0.41）三组两两比较,差异无统计学意义（p>0.05），但分别与模型组比较，差异均