丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

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时间:2019-02-19

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1、L丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用硕士研究生:指导教师:指导小组:专业名称:白艳娟辛世萌教授尹琳教授神经病学摘要目的:采用丁苯酞药物预处理的方法,运用Sprague.Dawley(SD)大鼠局灶性脑缺血再灌注(MCAO)模型,通过观察神经功能缺损程度,测定脑梗死体积,检测脑组织内半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶一3(Caspase.3)、Bcl.2表达的变化,研究丁苯酞预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法:健康成年SD雄性大鼠48只,体重200.2509,清洁级,室温环境饲养,自由进食水。按随机原则

2、分为假手术组、缺血再灌注组、丁苯酞预处理后脑缺血再灌注组(丁苯酞预处理组),每组各16只。丁苯酞预处理组于术前5天开始予丁苯酞溶剂(以丁苯酞胶囊溶于生理盐水配成lOmg/ml混悬液,用前充分摇匀)以200mg/kg/d的剂量进行灌胃,1次/天;假手术组和缺血再灌注组亦均于术前5天开始以等体积生理盐水(O.9%氯化钠溶液)灌胃,1次/天。参照Zea-Longa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注(MCAO)模型,插入栓线18mm,缺血2h后拔出栓线,实施再灌注24h(假手术组仅暴露右侧颈总动脉,余不做其他处置)。参照Ze

3、vLonga5分制评分标准进行神经功能缺损评分,各组达再灌注时间点后,断头取脑,分别行(1)2%氯化.2,3,5.三苯基四氮唑(2,3,5.Triphenyltetrazaliumchloride,TTC)染色,并用photoshop图像分析观察脑梗死体积;(2)苏木精一伊红(Hematoxylin—eosin,HE)染色观察SD大鼠脑组织的病理形态;(3)免疫组织化学检测方法观察Caspase.3、Bcl.2表达的变化。结果:1、神经功能缺损评分:假手术组无神经功能缺损,评分均为0分;与假手术组相比,缺血再灌注组及丁苯酞预处理

4、组均有明显的神经功能缺损症状,有显著性差异(P

5、变性,细胞组织间水肿,并可见空泡样改变;与缺血再灌注组相比较,丁苯酞预处理组缺血部位神经细胞变性、坏死的数量有所减少,空泡样改变及组织间水肿程度有所减轻。4、免疫组织化学检测:(1)C雒pase.3的表达:假手术组C嬲pase.3阳性细胞仅见少量表达,与假手术组相比,缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均可见较多的C硒pase.3阳性细胞表达,有显著性差异(P<0.01);与缺血再灌注组相比,丁苯酞预处理组Caspase-3阳性细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Bcl.2的表达:假手术组Bcl.2阳性细胞仅见少量表达

6、;与假手术组相比,缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均可见较多的Bcl.2阳性细胞表达,有显著性差异(P<0.01);与缺血再灌注组相比,丁苯酞预处理组Bcl一2阳性细胞数量增加,差异有统计学意义(P

7、C嬲pase.3表达数量减少,抗凋亡细胞Bcl.2表达数量增加。3、丁苯酞可减轻缺血性脑血管病的发生程度,具有一定的神经保护作用。关键词:丁苯酞预处理脑缺血再灌注损伤CaSpase-3Bcl-22objective:ApplyingthemethodofNBPpreconditioning,usefocalischemiareperfusionmodelofSprague-Dawleyrat,throughobservingneurologicimpairment,measuringcerebralinfarctionvolum

8、e,detectingtheexpressionofcaspase-3andBcl-2levels,tOstudyneuroprotectivemechanismofNBPpreconditioningincerebralischemiarcpcrfusioni

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