ras、erk12信号分子在大鼠增殖抑制基因抗恶性胶质瘤细胞中的作用机制研究

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1、分类号：R6单位代码：10752密级：公开学号：201200211宁夏医科大学硕士研究生学位论文Ras、Erk1/2信号分子在大鼠增殖抑制基因抗恶性胶质瘤细胞中的作用机制研究TheInhibitiveEffectofRatHyperplasiaSuppressorGeneonMalignantGliomathroughRas,Erk1/2SignalMolecules学位申请人：蒋树财指导教师：沈冰申请学位门类级别：医学专业名称：外科学研究方向：胶质瘤基础研究所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一五年四月宁夏医科大学研究生部NingxiaMedica

2、lUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeTheInhibitiveEffectofRatHyperplasiaSuppressorGeneonMalignantGliomathroughRas,Erk1/2SignalMoleculesStudent'sName:JiangShucaiSupervisor:ShenBingSubjectCategory:MedicineMajor:SurgerySpecialty:GliomabasicresearchSchool:Theacademyofclini

3、calmedicineCompletionDate:Apr.2015宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要Ras、Erk1/2信号分子在大鼠增殖抑制基因抗恶性胶质瘤细胞中的作用机制研究摘要目的探索Ras-Raf-MEK-ERK信号通路中Ras、Erk1/2信号分子在大鼠增殖抑制基因(rHSG)抗C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用。方法将C6细胞分为三组：A—空白对照组（PBS）,B—腺病毒载体对照组（Adv-GFP），C—rHSG过表达组（Adv-rHSG-GFP）。Westernblot检测rHSG蛋白表达量；流式细胞仪分析感染效率和细胞周期；Weste

4、rnblot检测不同浓度、时间IGF-1刺激后，C6细胞p-Erk1/2蛋白的表达变化；以最适IGF-1刺激C6细胞，QRT-PCR和Westernblot检测H-ras、N-ras、K-ras、Erk1/2mRNA和蛋白表达变化，p-Erk1/2、p-Rb、Rb蛋白表达变化。结果腺病毒感染C6细胞后，90%以上的细胞表达GFP蛋白，C组rHSG蛋白表达量及G0/G1期细胞数明显高于其余两组（P＜0.01）；IGF-1在10ng/mL浓度下刺激C6细胞15min后，其p-Erk1/2蛋白表达量最高（P＜0.01）；IGF-1以该浓度刺激15min，三组

5、细胞H-ras、N-ras、K-ras、Erk1/2的mRNA及蛋白表达水平无明显差异（P＞0.05），C组细胞p-Erk1/2蛋白、p-Rb蛋白的表达量显著低于其余两组（P＜0.01），Rb的蛋白表达量三组无明显差异（P＞0.05）。结论rHSG可通过Ras-Raf-MEK-ERK信号通路抑制C6恶性胶质瘤细胞增殖。关键词：大鼠增殖抑制基因；rHSG；细胞周期；Ras、Erk1/2；恶性胶质瘤I宁夏医科大学硕士研究生学位论文英文摘要TheInhibitiveEffectofRatHyperplasiaSuppressorGeneonMalignant

6、GliomathroughRas,Erk1/2SignalMoleculesABSTRACTObjectiveToexplormechanismofRas,Erk1/2signalmoleculesintheinhibitiveeffectofrathyperplasiasuppressorgene(rHSG)onmalignantglioma.MethodsC6cellswereculturedinvitroandgroupedintothreegroups:A,blankcontrolgroup(PBS);B,theadenovirusvector

7、controlgroup(Adv-GFP);C,therHSGover-expressgroup(Adv-rHSG-GFP).WesternblotwasusedtodeterminetheexpressionofrHSGprotein,flowcytometerwasusedtoanalysetheeffectofrHSGoncellcycle;Westernblotwasusedtodeterminechangesintheexpressionofp-Erk1/2proteinwhichcouldbechangedbyIGF-1stimulatio

8、nindifferentconcentrationsandduration.ThemRNAex