qma对h_2o_2诱导pc12细胞凋亡的保护作用研究

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1、，声心单位代码１０４ＴＴ５串请编号１０４了５３１２１１０９分类音Ｒ９６Ｉ為乂聲＞硕±学位论文ＬＱＭＡ对Ｈ２化诱导ＰＣ１２细胞调ｔ的保护作用研究：ｖｒ：ｍ学科、专业：药理学研究方巧：神经药理学申请学位类别－：医学硕上申请人：赵髓指导教师；姬巧生教授二〇—五年五月关于学位论女独立完成和内容创新的声巧本人向河南大学提出硕击学位申请。本人郑重声巧：所呈或的学化论丈是本人在导师的指导下独立完成的，对巧研究的课题有新的见解。描我所知，除丈中特别加Ｗ说明、标泣

2、和致谢的地方外，论丈申不色拓其化人已结发表或撰吾过的研究成果，也不包括其化人为获得任何數育、科研机相的学位或证书巧使用过的材料一。与我同工件的罔辜对本研究巧做的任何贡献均已在论丈中作了明确的说明并表示了谢意。人（：糸＾学位申请学化论丈作者）菩左２０曰１５年公月）■Ｉ关于学位论女著作权使用授权书本人经河南大学审掠批准授予巧击学位。作为学位论丈的作者，本人完全了解并同意河南太学有关保留、化巧学化轮丈的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机相、數粗化集机构和本校图书馆等提供学位论丈（紙质文？本和

3、电子文本＾＾ｉ惧公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、）展览学校拽学保术发存展和进行学术交流等曰铜，可＾＾＾采取彰印、绝印、扫描和堵贝等复制手、汇瑞学位论丈（纸质丈本和屯子文本）。（涉及保密内容的学位论丈在祖密忘适巧本授权书）学化获得老（学位论义作者）签名：如旅义指２０咬年：Ｓ月曰学化论导教师暮名：年７－－５：月＼＞；１日THEEFFECTOFQMAINPC12UNDEROXIDATIVESTRESSINJURYADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofH

4、enanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineBy:ZhaoLuSupervisor:Prof.JiBianshengDate:Mar,2015摘要目的：探讨H2O2诱导的PC12细胞（大鼠嗜铬细胞瘤细胞，pheochromocytomacell）氧化应激损伤及多胺类化合物（polyamineanalogues，QMA）对其的保护作用。方法：采用不同浓度H2O2（100、300、500、700μmol/L）造成PC12细胞损伤

5、模型，运用MTT法对不同浓度H2O2对PC12细胞的活细胞数量进行检测，确定其对PC12细胞的最适合的损伤浓度；研究多胺类化合物QMA的细胞保护作用，倒置显微镜观察细胞的形态改变，结合MTT检测法评价多胺类化合物QMA、阳性药NAC、尼莫地平对PC12细胞的存活率的影响；通过吖啶橙（AcridineOrange，AO）、溴化乙锭（Ethidiumbromide，EB）双染法配合活细胞高内涵成像系统对PC12细胞的凋亡形态变化和特征进行记录；用罗丹明123（Rhodamine123，Rh123）染色法通过高内涵成像系统及流式细胞仪对细胞的线粒

6、体膜电位的变化进行测定；通过DCFH-DA染色使用流式细胞仪对细胞内ROS水平进行测定，作为对多胺类化合物抗氧化作用的补充说明；通过活细胞高内涵成像系统，用免疫组织化学法测定活化caspase-3的表达，研究多胺类化合物抗氧化作用的可能机制。结果：1.H2O2（终浓度为500μmol/L）作用PC1224h后，细胞的抑制率显著升高，而终浓度为1μmol/L，5μmol/L，25μmol/L的QMA可明显改善细胞的凋亡形态，H2O2造成的PC12细胞的细胞抑制显著降低，并显现出对浓度的依赖性。2.PC12细胞经500μmol/LH2O224小

7、时的损伤后，触发了胞内的氧化应激反应，导致细胞出现氧化应激损伤，诱导线粒体的膜电位的降低，增加了细胞内ROS含量。3.多胺类化合物QMA可显著减低细胞内的ROS含量，抑制H2O2介导的线粒体的膜电位的降低，明显改善了H2O2介导的凋亡形态，抑制活化caspase-3的表达。结论：通过体外实验证明，多胺类化合物QMA为H2O2介导的PC12细胞的氧化应激损害提供保护，为多胺类化合物在阿尔茨海默病中进一步研究带来了实验数据支持。关键词：多胺类化合物，H2O2，PC12细胞，细胞凋亡IABSTRACTObjective:Toinvestigate

8、theprotectiveeffectofpolyamineanaloguesonthehydrogenperoxide-inducedinjuryinratpheochromo