mir-30a靶向eya2基因对肺腺癌细胞恶性生物学表型的影响

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1、分类号密级公开编号溱大摩碩士所究生嗲像儉式题目靶向￡基因对肺腺癌细胞恶性生物学表型的影响学院（所、中心）生命科学学院专业名称遗传学研究生姓名袁云仓学号导师姓名肖春杰职称教授年月扉页论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可以采

2、用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可以将论文用于查阅或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研究生签名：导师签名：日期她摘要摘要肺癌是中国癌症死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌（是肺癌中常见的一种组织学类型，约占肺癌的左右，五年生存率仅为左右。目前对的分子发病机制还知之甚少，还有待于更多的研究。是一类进化上保守的非编码小在转录后水平

3、微调基因的表达。越来越多的证据显示可作为一个抑癌基因抑制多种肿瘤细胞的生长，在少数几种肿瘤细胞中还发现具有癌基因的特征。是蛋白家族成员之一，已报导能够促进乳腺癌细胞的侵袭、迁移、增殖和转化过程。然而，和在发生过程中的生物学功能和作用机制还未完全清楚。本文通过和预测，很可能是作用的一个点；进一步釆用免疫印迹（对在细胞株中的表达水平进行了定量检测，发现仅在肺腺癌细胞中的表达水平显著上调；实时荧光定量对在肺腺癌细胞和组织中的表达水平进行了检测，发现在肺腺癌细胞和例石蜡包埋的肺腺癌组织中的表达水平均显著下调

4、；双荧光素酶报告基实验以及在细胞和细胞中转染和验证了直接作用于而抑制其蛋白的表达水平；划痕实验（、细胞活力检测、细胞侵袭实验及流式细胞周期分析对向是否能够影响细胞的恶性生物学表型做了初步评估，结果发现过表达抑制了细胞的迁移和侵袭，对增殖和周期进程无影响，而对细胞的侵袭、迁移、增殖和周期进程都起到了显著的抑制作用。上述结果表明了能够靶向调控肺腺癌细胞中蛋白的表达水平，且这种调控关系很可能与细胞迁移和侵袭相关，对增殖和周期进程无影响。关键词：；；；迁移；侵袭云南大学遗传学硕士学位论文，，，Abstrac

5、tmayberelatedtomigrationandinvasionofA549cellsbutnotcellproliferationandcellcycle.Keywords：云南大学遗传学硕士学位论文目录■胃录主要缩略词简表第章前言、肺癌概述肺癌流行病学肺癌分类与分期肺癌的遗传易感性肺癌的分子发病机制、的命名的成熟过程及作用机制的定量检测靶基因的预测的功能分析与人类癌症与、蛋白家族概述蛋白的结构与活性蛋白的细胞功能蛋白与人类癌症、本文立项依据第章材料与方法、主要仪器设备、主要实验试剂、实验材

6、料、实验内容与方法目录细胞培养检测细胞中靶基因的表达水平溶液配制实验流程莲环引物（设计总提取细胞总提取组织总提取检测细胞和组织中的表达水平细胞瞬时转染双荧光素酶报告实验主要试剂配制质粒构建转染级别质粒抽提细胞培养与共转染双荧光素酶报告系统检测细胞恶性生物学表型的检测实验检测细胞迁移基于染色的流式细胞周期分析法检测细胞增殖实验检测细胞侵袭、数据分析第章实验结果与分析、预测在是否有互补结合位点、检测细胞株中的蛋白水平、检测在肺腺癌中的表达水平总提取细胞和例肺腺癌组织中表达水平的实时荧光定量检测引物信息云

7、南大学遗传学硕士学位论文数据分析、靶向作用于‘及序列的设计与合成载体构建及测序数据分析、水平和表达的相关性分析、或能抑制细胞的迁移能力、对细胞的周期进程没有影响、对细胞的增殖没有影响、或能抑制细胞的侵袭能力、、、不能靶向调控细胞中的表达第章讨论参考文献：主要缩略词简表主要縮略词简表缩略词英文全名中文全名非小细胞肺癌小细胞肺癌微小小干扰信使互补脱氧核糖核酸非编码区蛋白酪氨酸磷酸酶核苷酸碱基对每分钟转速聚合酶链式反应氨苄青霉素溶源性培养基十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳诱导的沉默复合体磷酸盐缓冲液缓冲盐

8、溶液胎牛血清牛血清蛋白焦碳酸二乙酯二甲基亚砜聚偏氟乙烯碘化丙啶四甲基乙二胺苯甲基磺酰氟过硫酸铵二甲基噻唑基羧甲酯基磺苯基四唑流式细胞术第章前言第章前言、肺癌概述肺癌流行病学肺癌是近二十年来全球最普遍的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均居各癌症之首，每年有超过万人死于肺癌。据美国国立癌症研究所（估计，年美国将新增，例肺癌患者，因肺癌死亡的人数将达人，肺癌患者年生存率仅为由《中国肺癌登记年报》统计数据可知，我国肿瘤登记地区肺癌的发病率为万，全国人口标化率为万（世界人口标化率