选择适宜的灌注去细胞方法应用于全肝脏去细胞支架的制备

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1、分类号密级ＵＤＣ编号硕去学位论文选捧适宜的灌注去细胞方法应用于全巧脏去细胞支架的制奋Ｄｅｅｒｍ－ｔｉｎｉｎｇｔｈｅＩｄｅａｌＤｅｔｅｒｇｅｎｔＢａｓｅｄＤｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎＰｒｏｔｏｃｏｌＡｐｐｌｉｅｄＦｏｒＰｒｅｐａｒｉｎｇＬｉｖｅｒＤｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄＢｉｏｓｃａｆｆｏｌｄ王康华导师姓名巧明新教授专业名巧肝胆外科培巧类型专业型论文巧交日期２０１５年３月３１日南方医科大学２０１２级硕±学位论文

2、选择适宜的灌注去细胞方法应用于全肝赃去细胞支架的制备化ｅ－ｒａｔｏｎＤｅｔｅｒｍｉｎｉｎＩｄｅａｌＤｅｔｅｒｅｎｔＢａｓｅｄＤｅｃｅｌ山ｌａｉｚｉｇｇＰｒｏｔｏｃｏｌＡｌｉｅｄＦｏｒＰｒｅａｒｉｎＬｉｖｅｒＤｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄｐｐｐｇＢｉｏｓｃａｆｏｌｄ０３１８００１２７课题来源：广东省科技计划项目（２０１巧）学位申请人王康华导师姓違潘明新教授专业名称肝胆外科培养类型专业型培养层次硕去研究生所在学院第二临床匯学院答辩委员会主席汪谦教授答辩委员会委员殷晓炫教

3、授简志祥教授许瑞云教授薛平教授２０１５年３月３１日广州硕去学位论文选择适宜的灌注去细胞方法应用于全肝脏去细胞支架的制备硕ｉ研究生：王康华指导老师：潘明新教授摘要研究目的及意义：一目前原位器官移植是治巧器官衰竭唯有效的方法。在美国每年大约有２７０００人因肝脏衰竭死亡，然而对于合适器官移植的需求远远超过了可利用的器官供体的数量一一，这短缺促进了些新的技术发展，这些技术Ｗ组织工程和再生医学为基础旨在创造出可移植的实质性器官。最近几年在组织工程和再生医一些明显进步，学领

4、域出现，有功能的组织和器官已经在体外被创造并且成功一些工程性组织及器官例如血管地被移植入受体。、膀脫、角膜及气管已有了明显的进步。Ｗ上的这些器官不依赖大的脉管系统就能表达功能，然而像巧脏、肾脏、肺及也脏就需要足够的血流量来维持其功能。如何产生保留着能供应营一养物质和氧气交换的完整脉管系统的大型器官是大挑战。解决这难题的一个很好办法就是利用自然的实质器官Ｗ获得包含着管道网络的完整结构一。将实质器官进行去细胞化就可得到这样个结构，这种方法不仅去除了大量的细胞和核性物质一些组织，还保留Ｈ维的细胞外基质结

5、构。例如也瓣膜、小肠黏膜下层己成功地通过去细胞化得到了相对简单的细胞外基质。这些研究结果显示去细胞方法不仅能应用产生简单组织的细胞外基质，还能将具有复杂结构的器官去细胞形成细胞外基质。对于大型并具有复杂结构的器宫，Ｗ灌注为基础的去细胞方法已成功应用也脏、肝脏、肺及肾脏；这种方法不仅能够去除细胞及核性物质，还保留Ｈ维的细胞外基质结构及完整的脉管系统。因引起免疫反应的细胞及细胞内成分的完整去除，保留的Ｈ维生物支架Ｉ摘要结构可安全地用于器官的移植。目前，有很多不同的方法应用于整个器官的去细胞，比

6、较常见的方法包括、。物理酶Ｗ及化学剂然而影响组织和器官去细胞的因素有多种包括：１．器官本身的结构特点．，包括细胞或组织的密度、器官脂质的含量及组织和器官的厚度２选择的去细胞剂的性质和特质一３．灌注技术的些物理参数在灌注去细胞过程中也是尤为重要的一环。就现在而言，对于不同种属的肝脏已有多种灌注去细胞方法应用于制备去细胞化肝脏支架－ＳＤＳ，主要ＵＳＤＳ和ＴｒｉｔｏｎＸ１００在去细胞过程中应用地最为广泛；为离子型去细胞剂，能溶解细胞质及细胞核膜，能有效地去除组织中的细胞及细胞成分包括（细胞核性残留物和

7、细胞质内蛋白），并保持胶原成分但容易破坏蛋白之间的相互作用去细胞剂ＷＴｒｉｔｏｎＸ－１００，；非离子为代表它破坏了脂肪链间和脂蛋白间的相互作用，保存了蛋白与蛋白间的相互作用，去细胞效果相对一ＳＤＳ巧弱。然而对于灌注技术中个重要的物理参数即灌注流速确鲜有具体的研究。那么如何根据Ｗ上的一些影响因素来选择适宜的制备去细胞化肝脏支架的方法，才能适到完全去除器官内细胞、细胞内成分及核性物质，并最小化地破坏细胞外基质一，Ｗ便为再细胞化提供近似于体内的生长微环境的目的，这点一显得尤为的重要，也需要我们进行进步的

8、探讨。因此在本次研究中，我们使用了不同浓度ＳＤＳ（０．７５％ＳＤＳ、０．５％ＳＤＳ、０．２５％ＳＤＳ）Ｗ及不同浓度Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００ｌ％Ｔｒｉｔｏｎ－－－ｎ（Ｘ１００、２％ＴｒｉｔｏｎＸ１００、３％ＴｒｉｔｏｎＸ１００）均Ｗ５ｍｌ／ｍｉ的灌