肝素修饰改善去细胞化猪肝脏支架材料的生物相容性.pdf

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1、目录1肝素修饰改善去细胞化猪肝脏支架材料的生物相容性⋯⋯11．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯191．6讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯341．7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯381．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯391．9英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯482致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5

2、03增加天然生物材料生物相容性的表面修饰(综述)⋯⋯⋯51泸州医学院硕士学位论文臁雠始彭啪化裟姝榭斗胜榭目鳓剃摘要I秽岁拦料岁型彳§目的：文章通过肝素修饰的方法，对改善作为组织工程支架材料的去细胞化猪肝脏的生物相容性进行了初步研究，以期望能将此方法用于改善组织工程肝脏材料的生物相容性，以及为其他血液接触的组织工程材料改善生物相容性提供一个参考办法。方法：我们用不同的肝素修饰方法制作了不同种类的肝素化去细胞化猪肝脏支架材料。t-LBL(tissueimmobilizedwithheparinbyionicbindingvialayer-by．1ayerself-assemblytec

3、hnique)支架材料是通过去细胞化猪肝脏支架经肝素层层白组装离子结合的方式完成的。t-MPA(tissueimmobilizedwithheparinbycovalentbindingviamulti-pointattachment)支架材料是通过去细胞化猪肝脏支架经肝素多点连接共价结合的方式完成的。t-EPA(tissueimmobilizedwithheparinbycovalentbindingviaend．pointattachment)支架材料是通过去细胞化猪肝脏支架经末端连接共价结合的方式完成的。文章通过甲苯胺蓝染色(Toluidinebluestaining)检测、

4、甲苯胺蓝比色法(toluidine．bluecolorimetricmethod)检测、H&E染色(HematoxylinEosinstaining)检测、凝血时间检测(coagulationtimetests)、血小板粘附实验(Plateletadhesion)、血浆复钙时间检测(Plasmarecalcificationtime)、材料上HepG2细胞培养实验(CellcultureofHepG2)、MTT分析、溶血度检测实验(Haemolysisratiomeasurement)和扫描电镜(scanningelectronmicroscopy，SEM)检测评估了肝素化去细胞化

5、猪肝脏支架材料的肝素化效果、抗凝血性泸州医学院硕士学位论文能、细胞相容性。结果：t-LBL，t-MPA和t-EPA肝素化去细胞猪肝脏支架材料拥有不同的肝素含量。肝素化的去细胞化猪肝脏支架材料比未肝素化的去细胞猪肝脏支架材料具有更好的抗凝血性能。和t-LBL，t-MPA肝素化去细胞支架材料比较，t-EPA肝素化去细胞支架材料拥有更多肝素、肝素释放速度更慢而保留的肝素比例更多。和t-LBL，t-MPA肝素化去细胞猪肝脏支架材料比较，t-EPA肝素化去细胞猪肝脏支架材料的凝血酶时间(thethrombintime，TT)，凝血酶原时间(prothrombintime，PT)，活化部分凝血

6、活酶时间(activatedpartialthromboplastintime，APTT)超出了设备测量范围。而且，t-EPA肝素化去细胞猪肝脏支架材料的血浆复钙时间是肝素修饰各组支架材料中最长的。t-EPA肝素化去细胞猪肝脏支架材料比对照、t-LBL和t-MPA更能促进HepG2细胞在材料上增殖、分布、聚集和伸展。结论：通过末端(end-pointattachment，EPA)连接肝素共价结合修饰的去细胞化猪肝脏支架材料较层层自组装(1ayer-by．1ayerself-assemblytechnique，LBL)和多点结合(multi—pointattachment，MPA)肝

7、素化去细胞化猪肝脏支架材料获得了良好的抗凝性和细胞相容性。鉴于在温和的水溶液条件下完成肝素修饰的去细胞化猪肝脏支架材料制备和其在肝脏组织工程中拥有良好的抗凝性能，本研究为制备其他组织工程用的具有良好抗凝性能的与血液接触的支架材料提供了一种参考方法。关键词：肝脏去细胞肝素生物相容性泸州医学院硕士学位论文HeparinModificationImprovesBiocompatibilityofDecellularizedPorcineLiverScaffoldsAbstr