脊髓去细胞支架对大鼠脊髓轴突再生的影响

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1、温州医科大学硕士学位论文分类号：R6单位代码：10343学号：151001182硕士学位论文论文题目:脊髓去细胞支架对大鼠脊髓轴突再生的影响研究生姓名：朱君毅学科专业：外科学（骨科学）类型：学术型指导教师：王健二O一八年五月温州医科大学硕士学位论文论文题目：脊髓去细胞支架对大鼠脊髓轴突再生的影响答辩委员会主席：劳杰教授复旦大学附属华山医院答辩委员会成员：滕红林教授温州医科大学附属第一医院肖健教授温州医科大学药学院论文答辩日期：2018年5月25日温州医科大学硕士学位论文目录英文缩略词表…………………………………………………………1中文摘要…………

2、……………………………………………………2英文摘要………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………5第一部分脊髓去细胞支架的制备及检测……………………………71实验材料……………………………………………………………72实验方法……………………………………………………………83结果……………………………………………………………12第二部分脊髓去细胞支架诱导损伤脊髓再生的研究………………154实验材料……………………………………………………………155实验方法……………………………………………

3、………………156结果……………………………………………………………18分析与讨论……………………………………………………………22小结……………………………………………………………………25参考文献………………………………………………………………26附录……………………………………………………………………31致谢……………………………………………………………………32综述……………………………………………………………………33参考文献………………………………………………………………44学位论文独创性声明…………………………………………………51

4、温州医科大学硕士学位论文英文缩略词表缩略词英文中文BBBBassoBeattieBresnahan运动学评分DAPI4’6-diamdino-2-phenylindole4’6-二眯基-2-苯基吲哚DCDecellularized去细胞ECMExtracellularMatrix细胞外基质FGFFibroblastgrowthfactor纤维母细胞生长因子GAP-43Growthassociatedprotein-43生长相关蛋白GFAPglialfibrillaryacidicprotein胶质纤维酸性蛋白HEHematoxylin-eosin

5、staining苏木精-伊红染色OCTOptimalcuttingtemperatureOCT胶水PBSPhosphateBufferSolution磷酸盐缓冲液SCISpinalCordInjury脊髓损伤SDSprague-Dawleyrats斯泼累格-多雷大鼠SEMScanningelectronmicroscope扫描电镜VEGFVascularEndothelialGrowthFactor血管内皮生长因子1温州医科大学硕士学位论文脊髓去细胞支架对大鼠脊髓轴突再生的影响中文摘要目的：在脊髓损伤过程中，损伤后一系列复杂的影响因素会导致损伤部

6、位神经再生的失败。目前没有很好的办法来恢复脊髓损伤所带来的功能缺失。在脊髓损伤后，损伤部位神经凋亡引起会引起成纤维细胞的增值，进而使损伤部位瘢痕增生，导致轴突无法在损伤后的微环境中再生。本实验主要研究目的是探究能否利用同种来源的生物材料来改善损伤部位的微环境从而促进神经在损伤部位的再生。在这个实验中，我们将脊髓制备成去细胞支架，并将支架移植入脊髓损伤的大鼠体内，探究其在损伤部位对神经再生的影响。方法：供体为：体重250-280g的健康SD雌鼠脊髓，将其脊髓制备成2cm长度大小的脊髓去细胞支架，并对支架进行HE，扫描电镜的鉴定。动物实验为250-3

7、00g健康雌性SD大鼠，将制备好的脊髓去细胞支架移植入损伤部位，建立大鼠脊髓损伤模型。随机分成3组：A组：支架移植组，大鼠脊髓损伤后将脊髓去细胞支架移植入损伤部位。B组，单纯损伤组，单纯大鼠脊髓损伤。C组，空白对照组，术后操作同前，不损伤脊髓。将3组实验组老鼠饲养12周，每周进行行为学评分，12周后取出损伤部位脊髓，进行组织学检测，检测再生蛋白Gap43，Nestin，NF200表达量的变化。结果：脊髓去细胞支架本身保留一定的脊髓形态，HE染色和扫描电镜检测显示脊髓去细胞支架具有一定的空间结构。通过免疫荧光染色检测显示支架由胶原蛋白组成并且其上携

8、带有一定的细胞因子。在体内实验研究中，我们将脊髓去细胞支架植入大鼠的受损的脊髓部位。支架移植组比单纯损伤组表现出明显的再生蛋白的表达如G