化学去细胞肌肉促进大鼠脊髓半横断后的轴突再生

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1、化学去细胞肌肉促进大鼠脊髓半横断后的轴突再生作者：薛辉，陈东，张秀英，刘颖【摘要】目的探讨化学去细胞肌肉支架移植后对大鼠损伤脊髓轴突再生的促进作用。方法将24只成年雄性大鼠制成脊髓半横断损伤模型后，脊髓缺损处分别植入化学去细胞肌肉、冻融去细胞肌肉和新鲜肌肉，空白组不做处理。术后4周，银染观察脊髓轴突的再生情况，对移植物中再生轴突进行计数，做统计学分析并用锇酸染色鉴定化学去细胞肌肉支架中的有髓神经纤维。另取6只化学去细胞肌肉治疗的模型鼠分别行HRP顺行和逆行示踪，1周后观察脊髓上行和下行轴突再生的情况。结果移植术后4周，空白组无脊髓再生轴突，化学去细胞肌肉中有大量再生的轴突，而冻融去细

2、胞肌肉和新鲜肌肉中的再生轴突很少。锇酸染色显示化学去细胞肌肉中的有髓神经纤维较少。HRP示踪证明化学去细胞支架再生的轴突来自于其上下两端的脊髓。结论化学去细胞肌肉支架可显著促进损伤脊髓的轴突再生。【关键词】脊髓损伤；去细胞肌肉；移植；轴突再生ABSTRACT:ObjectiveToevaluateeffectsofchemicallyextractedacellularmusclegraftinpromotingaxonalregenerationafterspinalcordhemisectioninadultrats.12MethodsTotally24maleratsunder

3、wentspinalcordlateralhemisection.Treatmentconsistedofapplicationofchemicallyextractedacellularmusclegraft(CEAM),freezethawedacellularmusclegraft(FAM),orfreshmusclegraft(FM)intothelesiongap,whichwasleftemptyinlesiongroup(L).Ratsineachgroupwerekilled4weeksafterinductionoftheinjury.Holmessilvers

4、tainingmethodwasperformedtodetectaxonalregeneration.Axonsinthegraftsofeachgroupwerequantified,andtheresultswereanalyzedstatistically.MyelinatednervefibersinCEAMwereshownbyosmicationstaining.InanothersetofsixratstreatedwithCEAM,regenerationofdescendingandascendingspinalfibersoneweekaftertranspla

5、ntationwasdeterminedbyanterogradeandretrogradeHRPlabeling.ResultsInallthenonimplantedanimals,nodefiniteaxonaloutgrowthintothelesionwasfound.ManyregeneratingaxonswerenotedtoextendintotheCEAMimplantedlesion,whilethenumberofregeneratingaxonsintheFAMorFMwasgreatlyreduced.However,myelinatednervefib

6、ersinCEAMwererelativelyfew.HRPtracingdemonstratedthattheCEAMgraftscouldpromotetheregenerationofdescendingandascendingaxonsinspinalcord.ConclusionCEAMcanpromoterobustregrowthofaxonsinspinalcord.12KEYWORDS:spinalcordinjury;acellularmuscle;transplantation;axongrowth脊髓损伤后，常因局部的抑制环境导致神经轴突不能再生。研究表明，周

7、围神经移植可促进脊髓损伤后的轴突再生[1]，但周围神经和脊髓直径大小的不同、供体来源有限等因素限制了外周神经作为移植体的应用。周围神经的基膜成分在促进神经纤维再生中起很重要的作用。骨骼肌因具有与神经相似的基膜结构，可作为神经的良好移植替代品[2]，但新鲜骨骼肌的移植可能会产生较强的免疫排斥反应。去细胞技术可去除骨骼肌细胞，有效消除骨骼肌作为移植体的抗原性，保留基膜成分，使这种移植成为可能。去细胞肌肉组织工程支架按制作方法大体可分为2种：冻融去细胞肌肉组织工