人脐血单个核细胞促进脊髓损伤后的轴突再生

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1、人脐血单个核细胞促进脊髓损伤后的轴突再生.L.编辑。作者：宁广智，冯世庆，班德翔，徐云强【摘要】[目的]讨论人脐血单个核细胞(humancordbloodmononuclearcells，HCMNCs)移植治疗大鼠脊髓损伤后损伤区域轴突再生情况和功能恢复。[方法]利用ImpactorModelⅡ打击器制成30例T10脊髓损伤模型，分组为：实验对照组(DMEM细胞培养基)，损伤后3dHCMNCs移植组，损伤后14dHCMNCs移植组，每组10例。以HE染色和免疫组化染色以及BDA顺行示踪染色观察脊髓损伤处轴突再生情况，结合对

2、各组实验动物脊髓损伤后肢体功能的恢复情况进行行为学评分(BBB评分)，综合评估脊髓功能恢复程度。[结果]与对照组比较，HCMNCs移植治疗能够明显促进神经轴突再生，改善功能恢复，损伤后14dHCMNCs移植组优于损伤后3d移植组，各组间疗效差异具有统计学意义(P<0.01)。[结论]HCMNCs在体内向神经元及神经胶质细胞分化，促进神经轴突再生和功能恢复。损伤后14d是移植的较为理想的时间。【关键词】脊髓损伤;细胞移植;人脐血单个核细胞;轴突再生　　Abstract：[Objective]Todiscussaxona

3、lregenerationandfunctionalrecoveryafterrat'sspinalcordinjuryancordbloodmononuclearcells(HCMNCs).[Method]ThirtyinjuredspinalcordmodelsofodelⅡatT10andthendividedinto3groupsrandomlyandevenly(DMEMcontrol,HCMNCsgrafted3dayspostinjuryandHCMNCsgrafted14dayspostinjury).Hi

4、ndlimbfunctionalrecoveryofratsineachgroupmunohistochemistrystaining,andBDAanterogradetracingotingnerveregenerationandfunctionalrecovery.RatsinthegroupofHCMNCsgrafted14dayspostinjuryhadbetterfunctionalrecoverythanthoseinHCMNCsgrafted3dayspostinjurygroup.Statistic

5、differenceexistedamongthreegroups(P<0.01).[Conclusion]HCMNCsdifferentiatedintoneuronsandglialcellsinvivo,otedaxonalregenerationandfunctionalrecoveryafterSCI.Forteendaysafterinjuryeforcelltransplantation.　　KeyancordbloodMononuclearcells(HCMNCs);axonalregeneratio

6、n　　脊髓损伤(spinalcordinjury，SCI)的治疗困难且致残率高，对人类的生命和健康构成极大威胁。细胞移植可以通过改变SCI后的病理过程从而促进脊髓功能恢复，其中干细胞移植是当前的热点。与其它来源干细胞相比，HCMNCs来源丰富，取材方便，无任何生理与伦理问题，且有较强的增殖分化能力;其低免疫应答性使得同胞间或非血缘供者移植后的急、慢性移植物抗宿主病的发生率低且程度轻[1]。因此作者拟在脊髓损伤后不同时间将HCMNCs植入损伤部位，观察脊髓损伤处轴突再生情况，并结合BBB评分，评估脊髓功能恢复程度，探讨治疗S

7、CI的新方法，并观察HCMNCs植入较为理想的时间，为临床应用提供新思路。　　1材料与方法　　1.1实验材料　　1.1.1组织来源健康成年odelⅡ打击器;超净工作台(天津医药设备厂);CO2培养箱(NAPCO5410，USA);荧光倒置显微镜(OLYMPUSBX-60，Japan);恒温冰冻切片机(LEUCER，USA);5μlHamilton微量注射器(上海精密仪器厂)。　　1.1.3实验试剂DMEM培养液(GIBCO，USA);胎牛血清(天津市北辰盛达生物制品厂);将上述2种试剂按4∶1配制成含有20%FCS的DME

8、M培养液作为培养基;NF200(Uslife，USA);生物素标记的葡聚糖胺BDA(VectorLabCo，USA);Hoechst33342(碧云天生物技术研究所)。　　1.2实验方法　　1.2.1实验分组30只EM实验对照组(DMEM组);损伤后3dHCMNCs移植组(HCMNCs-3组);损伤后