赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤后细胞内表达的实验性研究

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1、中图分类号:R651.2论文编号:HBLG2015-157UDC:密级:公开硕士学位论文赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤后细胞内表达的实验性研究作者姓名:梁振星学科名称:外科学研究方向:脊髓损伤学习单位:华北理工大学学习时间:3年提交日期:2015年5月5日申请学位类别:临床医学硕士导师姓名:白俊清教授单位:华北理工大学附属医院程爱国教授单位:华北理工大学附属医院论文评阅人:梁春雨教授单位:华北理工大学附属医院高顺红教授单位:唐山市第二医院论文答辩日期:2015年6月15日答辩委员会主席:姜保国教授关键词:急性脊髓损伤;赖氨酰氧化酶(LOX);氯化钴;β-氨基丙腈唐山华北理

2、工大学2015年6月TheStudyOnTheIntracellularExpressionOfLOXAfterAcuteSpinalCordInjuryInRatsDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyLiangZhenxing(Surgery)ProfessorBaiJunQingSupervisor:ProfessorChengAiGuoJu

3、ne,2015独创性说明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名:日期:2015年6月8日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定,即:已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文,学校有权保留、送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以将学位论文的

4、全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间:√□自授予学位之日起;□自年月日起。作者签名:导师签名:签字日期:2015年6月8日签字日期:2015年6月8日摘要目的本研究旨在利用自制改良的Allen式打击装置,探索赖氨酰氧化酶(LOX)在大鼠急性脊髓挫伤修复过程中是否存在表达及其意义。方法1)利用自制改良式Allen氏打击装置将12只雌性SD大鼠随机分为A、B、C三组,每组4只,分别以A组25g.cm(10g×2.5cm)、B组35g.cm(10g×3.5cm)、C组45g.cm(10g×4.5cm)势能撞击脊

5、髓,通过肉眼观察和HE染色观察,确定脊髓挫伤模型的势能。2)48只成年健康雌性SD大鼠随机分为A、B、C、D四组,A组为β-氨基丙腈组(β-Aminopropionitrile,BAPN,一种LOX抑制剂),B组为氯化钴组(CoCl2,一种LOX促进剂),C组为单纯损伤组(injury),D组为正常对照组(sham)。在采用Allen’s方法成功地复制大鼠急性脊髓挫伤模型的基础上,在损伤后不同时间段(1、3、7、14和30d)切取实验脊髓段制成石蜡切片,然后进行免疫组化研究。结果1)25g.cm的势能可以复制成大鼠脊髓挫伤模型。2)LOX在损伤脊髓和正常脊髓组织中主要表达

6、在细胞质中,阳性着色呈棕黄色细颗粒状形态,弥漫性或小片状分布。形态呈圆形、椭圆形、三角形、不规则形不等。3)LOX在各组脊髓组织中LOX的表达平均阳性率分别为A组30.03%、B组73.96%、C组42.35%、D组5.54%,差异具有统计学意义(P<0.05)。正常脊髓内的LOX阳性细胞很少,A、B、C三组LOX阳性细胞经时变化走势是相同的,均表现为1d开始增加,3d表达到达高峰,7d开始明显下降。A、B、C三组与D组比较以及三组间相互比较,均具有统计学意义(P<0.05)。结论1)自制改良的Allen氏打击法既可以理想的脊髓损伤模型应具备的条件,又能够防止操作过章程中

7、因大鼠可能出现移动而导致重锤撞击偏移目的区。25g.cm势能致伤类型为脊髓挫伤模型。2)正常的脊髓组织中也有少量的LOX阳性细胞表达,SCI后1d则会有明显地升高,在脊髓损伤后,BAPN能够通过抑制胶原和弹性蛋白间的共价交联形成从而起到抑制LOX的表达,CoCl2能够通过诱发和加重缺氧状态而促进LOX的表达。3)由此可以推测,LOX在神经细胞内以无活性形式存在,当细胞内底物水平大量增加时,LOX分泌则会增加。这种LOX表达及活性增加有可能会促进胶原纤维的交叉连接以及胞外基质重塑。-I-图21幅,表2个,参104篇。关键词:急性

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