赖氨酰氧化酶在大鼠脊髓慢性受压中的作用

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1、中图分类号：R681.5论文编号：HBLG2015-289UDC：密级：公开硕士学位论文赖氨酰氧化酶在大鼠脊髓慢性受压中的作用作者姓名：管瑀学科名称：外科学研究方向：脊柱外科学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期:2015年5月7日申请学位类别：临床医学硕士导师姓名：李永民主任医师单位：华北理工大学附属骨科医院论文评阅人：王志强教授单位：华北理工大学附属医院黄玉国主任医师单位：华北理工大学附属骨科医院论文答辩日期：2015年6月5日答辩委员会主席：张柳教授关键词：赖氨酰氧化酶；大鼠；脊髓慢性受压；B

2、BB评分；CSEP唐山华北理工大学2015年6月TheCriticalRoleofLysylOxidase(LOX)inChronicCompressionofRatSpinalCordDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofClinicalMedicinebyGuanYu(Surgery)Superv

3、isor:ProfessorLiYongminJune,2015独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研

4、究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日摘要目的通过渐进性螺钉植入法成功复制出慢性脊髓损伤的大鼠模型的基础上，比较赖氨酰氧化酶促进组、赖氨酰氧化酶抑制组、单纯慢性损伤压迫对照组各组间的不同，探讨赖氨酰氧化酶在大鼠脊髓慢性受压中的作用。观察不同组间皮层体

5、感诱发电位、慢性脊髓损伤后组织结构变异的关系探讨赖氨酰氧化酶对于慢性脊髓压迫的治疗意义。方法健康SD雌性大鼠随机分为四组：空白对照组（A组，n=15）；单纯慢性损伤压迫对照组（B组，n=15）；压迫+BAPNLOX抑制组（C组，n=15）；压迫+氯化钴LOX促进组（D组，n=15），建立慢性脊髓压迫模型后。B组，致伤后不做任何治疗处理，C组BAPN1g/KG（腹腔注射），D组CoCl230mg/L（给水）。饲养至8周以后，进行BBB评分、Tarlov运动评分及CSEP检测后获取大鼠脊髓部分组织进行RT-P

6、CR检测赖氨酰氧化酶表达含量，部分组织制成石蜡包块儿进行HE及免疫组化染色。结果经脊髓组织RT-PCR检测结果显示与空白对照组A组相比各压迫组大鼠的脊髓内赖氨酰氧化酶的表达含量均有不同程度的升高。其中LOX促进组D组升高最为明显，这说明氯化钴成功的促进了赖氨酰氧化酶的表达。而LOX抑制组C组升高的程度最低，说明β氨基丙晴按照预期的设想抑制了赖氨酰氧化酶的表达。CSEP实验结果显示随时间变化除对照组A潜伏期未见变化外，其余各组潜伏期均出现不同程度的延长。测得各压迫组间结果在6周后出现差异，在8周差异明显。第

7、8周时LOX促进组潜伏期为（18.06±0.67）ms，单纯慢性压迫阳性对照组为（19.76±0.82）ms，LOX抑制组为（22.16±0.74）ms。HE染色结果显示LOX抑制组D组与LOX促进组C组相比较白质中可见肿胀的轴突，轴突周围的空泡也较多，组织水肿较为严重、结构更为紊乱，细胞成分明显减少；灰质中可见神经元细胞皱缩更为明显，细胞核固缩，尼氏体更少甚至消失。利用免疫组化技术观察Bcl-2/Bax的表达情况从而检测脊髓神经细胞的凋亡情况。Bcl-2在各组中的表达水平为：LOX空白对照组A组的光密度

8、值为（0.48±0.01），单纯慢性损伤压迫对照组B组的光密度值为（0.36±0.02），LOX抑制组C组的光密度值（0.25±0.02），LOX促进组D组的光密度值（0.31±0.01）。各组比较差异明显有统计学意义（P＜0.05）。Bax在空白对照组A组的表达最低，其余三组表达均升高，其中C组升高最为明显。D组较C组有所降低且差异有统计学意义（P＜0.05）。-I-结论赖氨酰氧化酶可能在脊髓的慢性受压过程中起着重要的作用。