贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究

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1、序图分类号：R725.6单位代码：丨0660UDC：616.2学号：10660SI20194学科专业代码：100202密级.•公幵贵陨医学院2015届硕士学位论文(科学学位)贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究InvestigationonCharacteristicsof500CasesofHumanMeiapneumovirusInfectioninGuiyang研究生：郭鑫导师：崔玉霞教授年级：2012级专业：儿童感染与免疫二〇一五年五月贵阳医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师

2、的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究己发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名（手写）：导师签名（手写）：年r月>f曰^4年r月？/T日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件

3、和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“V”）：1、保密□，在_年解密后适用本授权书。2、不保密作者签名（手写）：.:导师签名（手写）：年月>T曰年x月/j日中图分类号：R725.6单位代码：10660UDC：616.2学号：10660S120194学科专业代码：100202密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染

4、特征调查研究InvestigationonCharacteristicsof500CasesofHumanMetapneumovirusInfectioninGuiyang论文作者：郭鑫指导教师：崔玉霞教授申请学位：医学硕士培养单位：临床医学院学科专业：儿科学研究方向：儿童感染与免疫研究起止日期：2014年1月至2014年12月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：靳蓉教授论文答辩日期：2015年5月14日二〇一五年五月贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究专业：儿科学专业方向：儿童呼吸研究生：郭鑫导师：崔玉霞第一部

5、分荧光定量PCR检测儿童NPA人偏肺病毒方法的建立【摘要】目的：观察比较实时荧光定量PCR（Real-timePCR）方法与普通反转录酶-聚合酶链锁反应（reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR）方法检测人偏肺病毒(humanMetapneumovirus,hMPV)的特异性、灵敏性，以建立能准确定量检测儿童深部鼻咽吸取物（nasopharyngealaspirate,NPA）hMPV感染的分子生物学检测方法。方法：用DNAstar软件分析hMPV原型株及

6、亚型的基因片段，找出相对保守的基因位点，根据保守基因位点分别设计出针对hMPVF基因的引物及探针，建立检测hMPVF基因的Real-timePCR方法，并同时根据引物设计原则设计RT-PCR的引物，对两种方法的特异性、灵敏性、重复性以及是否实用于儿童深部鼻咽吸取物hMPV感染的检测等指标进行比较评价。结果：Real-timePCR方法能够特异性的的检测儿童深部鼻咽吸取物hMPV，并且能进行定量分析，定量的敏感度可达到102拷贝，比较Real-timePCR方法与RT-PCR方法，其检出率分别为16%及9.8%，相对于

7、Real-timePCR，RT-PCR的灵敏度及特异度分别为31.3%及94.3%。结论：Real-timePCR检测hMPV敏感性明显高于RT-PCR方法，为临床开展儿童深部鼻咽吸取物hMPV感染的定量检测及贵阳地区hMPV感染流行病学调查建立了有效的分子生物学检测方法。【关键词】荧光定量PCR;普通反转录酶-聚合酶链锁反应;人偏肺病毒；第二部分贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究【摘要】目的：采用已建立的Real-timePCR方法检测贵阳地区儿童急性下呼吸道感染（Acutelowerrespirator

8、ytractinfections，ALRTI）住院患儿人偏肺病毒(humanMetapneumovirus,hMPV)感染情况，并对hMPV感染的流行病学特点和临床特征进行总结分析。方法：收集2014年1月～2014年12月全年间500例IIALRTI患儿深部鼻咽吸取物（nasopharyngealaspirate，NPA）和2ml静脉血标本,