莱菔硫烷通过nrf2-are通路减轻大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤

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1、中图分类号：R318.11论文编号：HBLG2015-086UDC：密级：公开硕士学位论文莱菔硫烷通过Nrf2-ARE通路减轻大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤作者姓名：韩燕学科名称：基础医学研究方向：心肌缺血再灌注学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期:2015年4月26日申请学位类别：医学硕士导师姓名：伊雪副教授单位：华北理工大学基础医学院论文评阅人：匿名单位：匿名单位：论文答辩日期：2015年6月7日答辩委员会主席：张祥宏教授关键词：莱菔硫烷；缺血再灌注损伤；Nrf2蛋白；HO-1蛋白；NQO1蛋白唐山华北理工大学2015年6月S

2、ulforphaneReducesColdMyocardialIschemiaReperfusionInjurythroughNrf2-AREPathwayinRatsHeartTransplantationDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyHanYan(BasicMedicine)Supervisor:As

3、sociateProfessorYiXueJune,2015独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：2015年6月7日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学

4、位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：2015年6月7日签字日期：2015年6月7日摘要目的观察Nrf2-ARE通路对大鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响及莱菔硫烷保护大鼠移植心脏的相关机制。方法1实验模型的建立和分组：健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠40只随机分成3组：Sham组（假手术组，n=8），I/R组（

5、缺血再灌注组，n=16），I/R+SFN组（莱菔硫烷预处理组，n=16）。Sham组：仅行开/关腹手术，术前24h经鼠尾静脉注射等量的生理盐水；I/R组：受体于移植前24h经鼠尾静脉注射等量的生理盐水；I/R+SFN组：受体于移植前24h经尾静脉注射SFN2.5mg/kg；其中I/R组和I/R+SFN组均将冷藏于4℃HTK液9h的供心移植到受体大鼠腹腔，建立大鼠同种异体异位心脏移植模型，移植后24h两组均将移植心脏取出；Sham组开/关腹24h后取自体心脏。2检测指标：心肌酶学：再灌注后6h、24h分别从受体鼠眼内眦静脉取血，检测血清中

6、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白T（TnT）的水平。采用硫代巴比妥酸法（TBARS）法、黄嘌呤氧化酶法分别检测心肌组织中脂质过氧化物（LPO）含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。用HE染色法观察各组心脏移植后供心心肌组织学变化。应用免疫组织化学法（EnVision两步法）及免疫蛋白印迹法观察Nrf2、HO-1和NQO1在各组心脏移植后24h供心心肌组织的蛋白表达水平。结果心肌酶学：与Sham组比较，I/R组，I/R+SFN组血清中LDH、CK-MB、TnT含量明显升高（P＜0.05）；莱菔硫烷预处理后，缺血

7、再灌注6h，与I/R组比较，I/R+SFN组血清中LDH、CK-MB、TnT含量明显降低（P＜0.05），再灌注24h，I/R+SFN组TnT含量、CK-MB活性、LDH活性明显降低（P＜0.05）。心肌组织中LPO含量及SOD的活性：与Sham组相比，I/R组和I/R+SFN组心肌组织SOD活性明显降低（P＜0.05），而心肌组织LPO含量明显升高（P＜0.05）；与I/R组比较，I/R+SFN组心肌组织SOD活性未见明显变化；而心肌组织LPO含量显著降低（P＜0.05）。心肌组织学：Sham组：心肌纤维排列整齐，结构清楚，无心肌纤维

8、的破坏，组织间隙无炎细胞渗出，胞核清晰。I/R组：心肌细胞结构紊乱、较多心肌纤维断裂、大量中性粒细胞浸润；I/R+SFN组：心肌结构较清楚，心肌纤维排列较整齐，心肌组织中心肌间质散在中性粒细胞浸润。心肌组织