红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤

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1、ASOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文______________/论文题目____红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤研究生姓名朱琳指导教师姓名孙建辉专业名称内科学（心血管病学)研究方向冠心病论文提交日期20】5年4月苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社

2、）、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉密论文论文作者签名：-4^4-日期：^红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤中文摘要红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤中文摘要目的研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方

3、法实验一部分：使用不同浓度（0.25mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、4mmol/L）同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）刺激人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs），处理24小时后，使用MTT法检测HUVECs生存率。实时荧光定量PCR法（RealtimePCR，rtPCR）检测免疫球蛋白重链结合蛋白（bindingimmunoglobulinprotein，Bip）和C/EBP同源蛋白（transcriptiona

4、lfactorC/EBPhomologousprotein，CHOP）的基因转录水平。Westernblot法检测Bip、CHOP蛋白表达水平，PKR内质网激酶（proteinkinaseRNA(PKR)-likeERkinase，PERK）、内质网核信号转导蛋白1α（inositol-requiringprotein-1α，IRE1α）、磷酸化水平。实验二部分：预先使用不同浓度的红景天苷（Salidroside，Sal）（3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L）预处理HUVECs2小时，再根据实验一的结果，

5、挑选出合适浓度的Hcy（1mmol/L），加入HUVECs中共同培养一段时间。使用实验一介绍方法检测各指标。结果Hcy组细胞生存率低于空白对照组（P<0.05），Bip和CHOP的基因表达量和蛋白表达量显著升高（P<0.05），PERK和IRE1α的磷酸化水平在较短时间内升高（P<0.05）。高浓度红景天苷（300μmol/L）与Hcy共同作用组的细胞生存率显著高于仅有Hcy刺激的实验对照组（P<0.05），并且Bip和CHOP的基因表达和蛋白表达均下降（P<0.05），PERK和IRE1α的磷酸化水平均下调（P<0.05

6、）。结论红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVECs损伤具有保护作用，机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。关键词动脉粥样硬化，内皮细胞，高同型半胱氨酸血症，红景天苷，内质网应激作者：朱琳指导教师：孙建辉红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤英文摘要SalidrosideattenuatsHomocysteine-inducedinjuryinhumanumbilicalveinendothelialcellsviainhibitingEndoplasmicReticulumStres

7、sAbstractAimEndoplasmicReticulumStressplaysanimportantroleintheapoptosisofhumanumbilicalveinendothelialcells（HUVECs）.Salidroside,aphenylpropanoidglycosideisolatedfromRhodiolaroseaL,couldexertpotentanti-apoptosisproperties.MethodsPart1.HUVECswereculturedindifferent

8、concentrationsofHcy(0.25mmol/L,0.5mmol/L,1mmol/L,2mmol/L,4mmol/L)for24hours.CellviabilitywasassessedwithMTTassay,thegenetranscriptlevelsofbindingimmunog