melatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究

《melatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SOOCHOWUNIVERSITY博士专业学位论文论文题目Melatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究研究生姓名杨玲指导教师姓名张晓膺专业名称心胸血管外科学研究方向冠心病的基础与临床论文提交日期2015年3月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人承担本声明

2、的法律责任。论文作者签名：f、.b今曰期：士苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被査阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在______年_月解密后

3、适用本规定。非涉密论文口导师签名:论文作者签名:>bMelatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究中文摘要Melatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究中文摘要第一部分Melatonin抑制缺氧状态下人脐静脉内皮细胞的迁移及HIF-1α的表达目目目的的的：的：：：探讨Melatonin对缺氧状态下HUVECs迁移及HIF-1α表达的影响。方方方法法法：法：：：1、HUVECs分别予常氧状态、缺氧、缺氧加melatonin处理，以细胞划痕实验及实验检测HUVECs迁移率。2、HUVECs在缺氧和常氧条件下培养，以免疫

4、印迹法检测HIF-1α的表达；经melatonin干预后，HUVECs暴露于缺氧状态后以免疫印迹法检测HIF-1α的表达；3、HUVECs转染HIF-1αsiRNA后在缺氧状态下培养，以细胞划痕实验检测HUVECs迁移率。结结结果果果：果：：：1，缺氧状态下HUVECs的迁移较常氧状态增加，melatonin作用后可使HUVECs迁移下降，melatonin的作用与剂量成正比。2，缺氧后HIF-1α表达增加，HIF-1α被siRNA干扰后HUVECs迁移受到抑制。Melatonin通过抑制缺氧后HIF-1α的表达而使HUVECs迁移受到抑制。结结

5、结论论论：论：：：Melatonin可抑制缺氧诱导的HUVECs迁移，其作用呈剂量依赖性；melatonin抑制缺氧后HIF-1α的表达进而抑制HUVECs迁移。关键词关键词：关键词：：：melatonin；缺氧；HIF-1α；迁移；HUVECs第二部分Rac1参与Melatonin抑制缺氧诱导HUVECs迁移的机制研究目目目的的的：的：：：探讨Rac1参与Melatonin抑制缺氧诱导HUVECs迁移的机制。方方方法法法：法：：：1，HUVECs在缺氧及常氧状态培养后以GST-pulldown实验检测Rac1活性；2，HUVECs转染Rac1-

6、V12或空载体质粒（对照组）后予以melatonin干预，以GST-pulldown实验检测Rac1活性，以免疫印迹法检测HIF-1α的表达,以细胞划痕I中文摘要Melatonin抑制缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞迁移的机制研究实验检测HUVECs迁移率。3，HUVECs转染Rac1-T17N或空载体质粒（对照组），以细胞划痕实验检测缺氧状态下HUVECs迁移情况。4，以细胞免疫荧光染色检测缺氧状态下Rac1的定位。5，以免疫印迹法检测细胞溶菌产物ERK磷酸化程度；HUVECs经ERK抑制剂U0126干预后以细胞划痕实验检测HUVECs迁移率。结结结

7、果果果：果：：：1，Melatonin抑制缺氧状态下HUVECs中HIF-1α的表达，该过程需要Rac1参与。2，Melatonin对缺氧诱导的HUVECs细胞迁移的抑制作用与其阻断Rac1活化有关。3，缺氧可促进Rac1从细胞浆中（可溶部分）转移到细胞骨架（不溶部分），而且这种现象可被melatonin逆转。4，ERK激活是Rac1活化的上游途径之一，melatonin抑制缺氧诱导的Rac1活化及HUVECs迁移与其阻断ERK的磷酸化有关。结结结论论论：论：：：Melatonin抑制缺氧状态下HUVECs中HIF-1α的表达，该过程需要Rac1

8、参与。ERK激活是Rac1活化的上游途径，melatonin抑制对低氧诱导的Rac1活化及HUVEC迁移与其阻断ERK的磷酸化有关。关键