硫酸吲哚酚诱导脐静脉内皮细胞损伤及α-硫辛酸的干预作用

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122443HebeiMedicalUniversity科学学位硫酸吲哚酚诱导脐静脉内皮细胞损伤及a-硫辛酸的干预作用研究生：郜同心导师：曾文副教授专业：内科学二级学院：北京市垂杨柳医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河

2、北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。•i:iC!'S研究生签名导师签章二级学院^导盖寧i‘二：..•V：年0河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名导师签章：wr年^月4日目录摘要...................................

3、......................1ABSTRACT.....................................................3英文缩写.....................................................6研究论文硫酸吲哚酚诱导脐静脉内皮细胞损伤及Α-硫辛酸的干预作用7前言.....................................................7附图...................

4、.................................20附表....................................................25讨论....................................................27结论....................................................32参考文献.............................................

5、.......33综述Α-硫辛酸在慢性肾脏疾病中的应用........................36致谢........................................................48个人介绍....................................................49中文摘要硫酸吲哚酚诱导人脐静脉内皮细胞损伤及硫辛酸的干预作用摘要背景：内皮细胞功能障碍和氧化应激是心血管疾病发生发展的主要机制，慢性肾脏病(Chronicrena

6、ldiseaseCKD)患者体内尿毒症毒素堆积是并发心血管疾病的高风险因素；其中蛋白结合型尿毒症毒素硫酸吲哚酚(IndoxylSulfateIS)能产生促氧化的作用，诱导血管内皮功能障碍,促进心血管疾病的发生发展，近年来抗氧化剂改善内皮细胞功能障碍的研究备受关注。目的：以人脐静脉内皮细胞(HumanumbilicalveinendothelialcellsHUVEC)为实验模型，探讨抗氧化剂硫辛酸(alpha-lipoicacidLA)是能否干预尿毒症毒素硫酸吲哚酚(IS)诱导的氧化应激和血管内皮细

7、胞损伤并初步探讨其作用机制。方法：对人脐静脉内皮传代细胞进行体外培养，将其分成正常对照组、硫酸吲哚酚(IS)组、硫辛酸(LA)组及硫酸吲哚酚和硫辛酸联合组(简称LA+IS组)；通过ELISA法测定细胞内3-硝基酪氨酸(3-Nitro-L-tyrosine3-NT)的含量，黄嘌呤氧化酶法测定细胞超氧化物歧化酶(SuperoxidedismutaseSOD)活性，比色法测还原性谷胱甘肽(GlutathioneGSH)的含量，硝酸还原酶法测量细胞培养液中一氧化氮(NitricoxideNO)的含量及比色法

8、测一氧化氮合成酶(NitricoxidesynthaseNOS)活性，通过RT-PCR及荧光定量PCR技术分析内皮型一氧化氮合成酶(EndothelialnitricoxidesynthaseeNOS)的表达。统计学处理采用SPSS17.0软件，结果用均数±标准差表示。多组间均数比较采用单因素方差分析(ANOVA),均数两两比较采用Bonferroni法检验，P＜0.05具有统计学意义。各组实验至少重复4次。结果：1血管内皮细胞氧化应激指标①测定培养液GSH含量，与正