饲料中氨基酸的hplc检测方法研究

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1、^^Jf^fAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI全曰制硕士专业学位(毕业)论文饲料中氨基酸旳HPLC检测方法研究学位申请人：尤晓蒙指导教师：锁然副教授研究领域：食品加工与安全学位名称：农业推广硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月三H曰独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均

2、已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期：201上年&月；2•日学位论文版权使用授权书太受份论玄作者宗令了解河北农ik•大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河匕农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名:导师签名:签字日期：劲丨•？年<月<2签字日期：20/T年上曰学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话:通讯地址：邮编:分

3、类号：S816.17单位代码：10086密级：公开学号：20139070533饲料中氨基酸的HPLC检测方法研究Studyondeterminationofamionacidsinfeedsbyhighperformanceliquidchromatography学位申请人：尤晓蒙指导教师：锁然学位名称：农业推广硕士研究领域：食品加工与安全授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月三十一日摘要饲料中的氨基酸是畜禽的重要营养物质，动物对蛋白质的需求实际上是对氨基酸的需求。饲料中含有的氨基酸种类和含量是判定饲料质量高低的重要指标。因此，饲料中氨基酸的

4、准确分析、测定十分重要。但氨基酸分析误差较大，可能是由于不同的水解条件和不同的分析方法所造成的。氨基酸的分析测定是一个复杂的过程，所以需要建立一套完善的饲料中氨基酸的检测方法。蛋白质的氨基酸分析分成三大步骤，第一，把蛋白质彻底的水解为游离的氨基酸混合物；第二，用色谱的方法把混合的氨基酸分离成单个的氨基酸；第三，测定每个氨基酸的含量。目前，采用常规的酸水解法测定蛋白质氨基酸的含量，因为色氨酸在酸水解过程中几乎都被破坏，无法与其他的氨基酸一起测定，所以只能单独测定。本研究分为两大部分，一部分是柱前衍生高效液相色谱法测定饲料中的氨基酸；另一部分是高效液相色

5、谱法测定饲料中的色氨酸。具体内容如下：本试验建立了以2,4-二硝基氯苯为柱前衍生剂的高效液相色谱法测定饲料中的氨基酸。通过对前处理条件中酸解剂、酸样比、盐酸浓度、水解温度、水解时间、通氮气、微波水解时间、微波水解温度、微波水解与常规水解的比较，衍生条件中衍生剂用量、衍生反应时间、衍生反应温度、衍生反应缓冲液、衍生反应缓冲液pH�色谱条件中色谱柱、缓冲液、缓冲液pH�缓冲液浓度、三乙胺加入量、洗脱程序、流速、色谱柱温度、有机洗脱溶剂、检测波长进行研宄，建立了19种氨基酸的标准曲线，其相关系数范围为0.9901�0.9993;检出限为0.69�5.70m

6、g/L;加标回收率为91.9%�110.7%。结果表明，本方法操作简单，无干扰，具有较好的准确度和较高的灵敏度，能够满足饲料中氨基酸的定量分析。本试验还建立了高效液相色谱法测定饲料中的色氨酸。通过对前处理条件中碱解剂种类、碱解剂浓度、碱解剂用量、碱解时间、碱解温度、通氮气，色谱条件中缓冲液、流动相pH�有机洗脱溶剂、流动相组成、流动相流速、色谱柱温度、检测波长的研宄，建立了色氨酸的标准曲线，其相关系数为0.9998;检出限为O.llmg/L;加标回收率为93.5%。结果表明，本方法操作简单，无干扰，具有较好的准确度和较高的灵敏度，能够满足饲料中氨基酸

7、的定量分析。关键词：饲料；氨基酸；高效液相色谱；检测方法StudyondeterminationofamionacidsinfeedsbyhighperformanceliquidchromatographyAuthor:YouXiaomengAdvisor:SuoRanMajor:FoodprocessingandsecurityAbstractTheproteininfeedisoneoftheimportantnutrientsoflivestocks.Infact,animalwhichneedsproteinisthedemandofthe

8、aminoacid.Theaminoacidtypeandcontentofthefeedcontainth