欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:34926098
大小:14.93 MB
页数:75页
时间:2019-03-14
《甘蔗内生固氮菌klebsiella variicola dx120e固氮酶基因的克隆和功能分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、./^.:/:月"I>:串"寒常非.浸f^琴IV多争:妾;l;i巧4V議莱色画接苗名令攀参.早/馬紙.U苗奸蠢&斗、糾;论文’终心變揉寒;藻勢:,謂讀.賽:一氏驚\;’.、藝.新麵‘呀w..^在;義心‘;追?譯"¥.-2起梦';矿趕^':击5甘廉内生赖茵!51W腳DXg:>固诚基因的克和功嫌桥却i'..八,.V.接廷"...,!.气京;'黄^.養’乂/T;和r.一:V.v遵培r迄巍一y;-,苗.寒.r、,若.妃/、、必皆譯;萬c轉觀V心:P护\.I:以.、..给.:袭..厳¥藍;.;醉秦.^脊苗發张瑪,;嘗著。托輔叛-、-和革转.窜i違蒙4.^苗v無送打a
2、f孩,弓為.壽f#:,..>、;^诗、;與.记皆i.韋藤板八、^3#這^^、!^s養一.襄t.苗丢秦、^0A转於>,\.篆.;-為r、V^"禹在讀>壤、.、.^铅/X養-巧.第舊C是鮮於:案A.;‘蔡V..;冰4舊管毒.K蔡娩;藏....产iV、餐‘./.&..讀賓":,為:讀.:第,:/.:';^%」禪^;皆、,M"、K祭一‘^苗岭表祭-;。.立..异I‘幸辑為朽追接轰^讓巧^、处4這-邊讓担.o.'沒与證^.处分类号S566.1密级公开UDC硕±学位论文甘庶内生固氮菌風沁侃var说
3、o/aDX120E固氮酶基因的克隆和功能分析张瑕瑶学科专业植物学指导教师邢永秀副教授论文答辩日期2015-05-23学位授予日期2015-06-29答辩委员会主席李杨瑞教授广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加标注和致谢的地方外,论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研巧成果,也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料一。与我同工作的同事对本论文的研巧王作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学
4、位论文及相关的职务作品,知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权,目P;学校有权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可^^^采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于:□保密,在年解密后适用授权。回不保密。""(请在W上相应方框内打V)论文作者签名:^矣碱觀日期:节咬指导教师签名日期:>也t、口/作者联系电话;电子邮箱:’甘薦内生固氮菌近feAwc航fvw撤0/<iDX12OE固氣
5、巧基因的克隆和功能分析摘要一量内生固氮菌已有较甘藤为主要的糖料和能源作物之,从甘庶体内分离获得大’故多报道。贷诚sze舶胃0伯DX120E是本实验室从广西大新县种植的甘藏品种新台糖一22号(ROC22)根内分离得到的株具有高固氮活性的革兰氏阴性细菌,该菌可在甘薦体内的定殖,接种DX120E对不同甘庶晶种具有明显的促生效应,但关于思诚始航V。州co/幻DX12祀固氮酶分子方面的研究述尚未见报道。本研巧对在固氮过程中起重'要作用的固氮酶基因(喊K喊D,n骑:)进行克隆及表达分析i同时检测了DX120E一X的月卿基因在ROC22组培苗中的表达,为进
6、步研巧D12犯与甘庶的互作奠定基础。主要研究结果如下:1DX12祀固:).设计克隆氮酶(喊K喊D基因的時异性引物,W仿如a,n游/)vanYco/aDX120E为模板,《,PCR扩増得到含有酶切位点的《诉诉和《骑:基因的■ORFn)。结果表明w882bGe地ank登陆号为KF732646基因,卿基因ORF为p,;游ORF为1452bp,GenBank登陆号为邸732648;n狗:甚因ORF为1563bp,GenBank登陆号为KF732647。H个基因功能区域保守性均很高。进化树分析表明三个基因的’e侃一贷efcziS氨基酸序列
7、均与p.聚于同进化分支。--n2)ETnifHETifD.本研究成功构建了0巧/,n游和M骑:基因的原核表达载体p,p°ET-n和pi化。在28C条件下,用1.0mmol/LIPTG诱导的m/D和《解基因均可表达;一n与预期大小111巧,ifK蛋白^^可溶性蛋白致的融合蛋白,蛋白^包涵体形式存在(存在,经质谱检测鉴定为ni近和nifK蛋白,为今后深入研究两个基因的功能及抗体的制备奠定了基础。■eeAS0-3.采用Wstrnblot技术,用
此文档下载收益归作者所有