球系列鞘糖脂生物合成通路关键基因启动子区甲基化对仔猪e.coli f18抗性的调控作用分析

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2、當部；巧－巧方．：．：葬导，／；：二系列銷箱脂生物合成通路关键基因启动子区甲ｉｇ＊：Ｖ＾对仔猪反－争ｃＷＦ１８抗性的调控作用分析心＾＾裴批哺游＂指导教师姓名＇／：包文斌巧究员，扬州大学，江苏扬州，２２５００９；＾＾＂＂＊■■吴圣龙研究员，巧州大学．，江苏巧州，２２５００９、，？申请学位级别：硕壬学科专业名称：动物遗传育种与笨殖《＾论文提交日期：２０１５年０５月论文答辩日期：２０１５年０５月２４日背‘＇学位授予单位：巧州大学学位授予日期：２０１５年０６

3、月２３日．来答辩委员会主席：朱满兴研究员江苏為音牧总站．．．。．．，：．巧＼鄭Ｖ，：奪；無聲您；乂ｆ－－步冷；二．：义＇二二献心豪聲１ｒ１包：違魏滅辜三哉国家自然科学基金（Ｎｏ．３１１７２１８３，Ｎｏ．３１１４００２７）ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｕｎｄｓＮｏ．３４００２７（．３１１７２１８３，Ｎｏ１１）转基因生物新品种培育科技重大专项ＮＯ．２０１４ＺＸ０８００６０１（巧ＮａｔｉｏｎａｌＭａｏｒＴｅｃｈｎｏｌｏ

4、ＰｒｏｅｃｔｓｏｆＧｅｎｅｔｉｃａｌｌＭｏｄｉｆｉｅｄＯｒａｎｉｓｍｓｊｇｙｊｙｇＢｒｅｅｄｉｎｇＮＯ．２０１４ＺＸ０８００６０１（巧江苏高校化势学科建设工程资助项目（ＰＡＰＤ）ＰｒｉｏｒｉｔｙＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｏｒａｍＤｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆＪｉａｎｓｕＨｉｈｅｒＥｄｕｃａｔｉｏｎｇｐｇｇＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓＰＡＰＤ（）王靖球系列銷糖脂生物合成通路关键基因启动子区甲基化对仔猪ＥｘｏｌｉＦｌＳ抗性的调控作用分析１球系列銷糖脂生物合成通路关键基因启动

5、子区甲基化对仔猪尼．Ｃ０／／Ｆ１８抗性的调控作用分析研究生：王靖导师：包文斌研究员吴圣龙研究员专业：动物遗传育种与繁殖（扬州大学动物科学与技术学院，扬州２２５００９）摘要腹泻是导致仔猪死ｔ的主要疾病，给养猪业带来了巨大经济损失。Ｆ１８大肠杆菌Ｆ－（￡ｃｏ＂１８）菌株是引起仔猪腹泻的主要病原菌，ａ２岩藻糖转移酶１。国外研究表明（Ｕ）ＭＡ的突变’基因Ｆ６７７３０７位点存在Ｇ／，该突变可Ｗ作为控制Ｅｃｏ／ｚＦ１８粘附的遗传标（）记，，并据此在国外猪种中实现了抗病育种但

6、是该位点在中国地方猪种群体中呈极端偏态分布，使得国内地方猪种抗Ｆ１８大肠杆菌病育种实践陷入了困境。课题前期通过表达谱芯片技术、蛋白质组学技术，对仔猪大肠杆菌病抗性型和敏感型全同胞配对个体，，进行了十二指肠组织基因表达谱差异的分析并确定了球系列銷糖ｃｏｓｈｔ－（ａ－脂生物合成通路（Ｇｌｙｐｉｎｇｏｌｉｐｉｄｂｉｏｓｙｎｈｅｓｉｓｇｌｏｂｏｓｅｒｉｅｓ）及通路中仍７７７（ｌ巧岩－－藻糖转移酶／７７岩藻糖转移酶２、（－２３唾液酸转１）、Ｆｔ）Ｐ半乳糖昔ａ，－－－－１）己醜半乳糖胺酶

7、Ｂ）移酶、片臣邸（ＰＮ，好？（ＰＮ乙醜半郭糖胺酶Ａ），公－（－－－乙酷基半ａ糖基转移酶１）和（Ｎ己醜基半乳糖昔酶Ａ）等７个关键糖Ｐｌ３Ｎ，基转移酿基因对Ｆ１８大肠杆菌病抗性具有调控作用。本研究进一步通过对％日龄仔猪肠道姐织中球系列銷糖脂生物合成通路中关键基因ＰＣ民＋Ｍｉ进斤ｍＲＮＡ定量检测，并采用ＢＳＰ（Ｂｉｓｕ做ｅＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）ｓ巧测序的方法，对十二指肠和空肠组织中这些基因启动子区的ＣｐＧ岛的甲基化进行了超高精度的甲基化定量检一１巧，，进｜同时分析了重要甲基化位点

8、对基因ｍＲＮＡ表达量的影响和调控作用步探讨仔猪对Ｆ１８抗性的分子调控机制，．ｃＷ／Ｆ为解决国内地方猪种￡１８抗性育种的关键科学问一一题提供定的依据，并为今后利用生物工程手段调控猪丘ＣＯ／／Ｆ１８抗性蛋白的活性提供２扬州大学硕±学位论文定的基础和依据。主要试验结果如下：￡’１．ｃｏ／ｚ１１．通过萊光定量在仔猪Ｆ８抗性和敏感群体１个组织中检测球系列銷糖脂生物合成通路中７个关键糖基化转