猪mnsfβ稳定表达细胞系的建立及促凋亡功能研究

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1、分类号：S828学校代码：10712UDC:636.4研究生学号：201205330密级：公开________灶衣林滸祆大学2015届攻读硕士学位研究生学位(毕业）论文猪_”稳定表达_聽建立及_亡功能学科专业预防兽医学研究方向分子病原学与免疫学研究生____________王亚平指导教师__________张德礼教授完成时间__________2015年5月中国陕西杨凌研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》

2、，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年《月4曰导师指导研宄生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的项士研究生所呈交的硕士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于

3、规范西北农林科技大学研究生学木道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研宄生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违背《中华人民共

4、和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人）未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）Classificationcode:S828Universitycode:10712UDC:636.4Postgraduatenumber:2012051330Confidentialitylevel:PublicThesisf

5、orMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015CONSTRUCTIONOFSUVECLINESTABLYEXPRESSINGPORCINEMNSFβANDINVESTIGATIONOFITSPRO-APOPTOSISFUNCTIONMajor:PreventiveVeterinaryMedicineResearchfield:MolecularVirology&ImmunologyNameofPostgraduate:WangYapingAdviser:Prof.ZhangDeliDateofsubmission:May2015Yangling

6、ShaanxiChina猪MNSFβ稳定表达细胞系的建立及促凋亡功能研究摘要单克隆非特异性免疫抑制因子-β（MonoclonalNonspecificSuppressorFactorβ，MNSFβ）是一种在机体内广泛分布的非抗原特异性免疫抑制因子，又是一种新的细胞凋亡调节因子和潜在的肿瘤抑制因子，可与不同的靶蛋白结合调控信号通路，在免疫调节和细胞凋亡过程中发挥重要作用。近年来在小鼠上被广泛研究，但其功能在猪中鲜有报道，猪是一种比小鼠更理想的医学实验动物模型，对猪MNSFβ（pMNSFβ）基因的研究将为人类MNSFβ基因及相关疾病的研究提供重要的理论支持。本论文主要针对pMNSFβ基因的

7、促凋亡功能展开研究，探究pMNSFβ是否与pBCL-G发生相互作用以及pMNSFβ与pBCL-G结合对细胞凋亡的影响。本研究获得的研究结果如下：1．通过瞬时转染和新霉素（G418）筛选稳定表达GFP-pMNSFβ猪脐静脉血管内皮细胞株（SUVEC），经倒置荧光显微镜观察和westernblot鉴定，稳定表达GFP-pMNSFβ的SUVEC细胞株构建成功。2．免疫共沉淀实验表明，pMNSFβ与pBCL-G蛋白能够发生相互作用。3．通过形态学观察和