氟对睾丸支持细胞与淋巴细胞共培养中fasl诱导淋巴细胞凋亡的影响

氟对睾丸支持细胞与淋巴细胞共培养中fasl诱导淋巴细胞凋亡的影响

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1、1ii分类号X503.22学号201誦、^巧農老六聲全日制硕±学位论文氣对睾丸支持细胞与淋己细胞共培养中FasL诱导淋己细胞调亡的影响11"幽,||1議古誦姓名;憂細指导教师:王俊东教授学科专业:临床兽医学培养单位:动物科技学院中国?山西?太谷二〇—五年六月ShanxiAriculturalUniversitgyM*asterDereeDisseita村ongEffectsoffluorideonaotosislmhocteme化at

2、edbppypyyfasLm-insertolicellsandlyphocytecoc山turedsystemQiiigliNieSupervisor:Prof.JundonWanggMaor:ClinicalVeterinarMe化cinejyResearch-Field:EnviroVeterinarScienceyTaiuSh泣nxiChinagJune.2015学位论文原创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文,是在导师指导下,独立进行研

3、究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文研究做出过重要贵献的个人和集体,均已在文中从明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签若(亲笔):年巧a襄而(^学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学;同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的原件、复印件和电子版;允许论文被查阅和借阅;本人授权山西农业大学可k乂将学位论文的全部或部分内

4、容编入有关数据库进你险索,可^乂采用影印、缩印或扛描等复制手段保存、汇编学位论文。作者签為(亲笔):襄%兩知年应月曰-日导师签違(亲笔):oi年月(?又//目录摘要1刖胃3一第章细胞模型的建立61材料与方法61.1实验材料61.2试验方法81.3数据统计112实验结果112.1睾丸支持细胞的鉴定112.2睾丸支持细胞的HE染色122.3睾丸支持细胞的吉姆萨染色12.24淋己细胞的相对存活率132.5淋己细胞的调亡率153分析

5、与讨论163.1支持细胞的结构1613.2支持细胞的功能73.3支持细胞的分离培养173.4支持细胞的鉴定183.5支持细胞染氣模型的建立183.6支持细胞与淋己细胞共培养18第二章染毒支持细胞与淋巴细胞共培养相关蛋白表达201材料与方法201.1材料201.2实验方法211.3数据统计232实验结果233分析与讨论24第H章染氣支持细胞与淋巴细胞共培养下相关基因MRNA表达的影响271材料与方法271.1#料271.2实验

6、方法282实验结果312.1RNA的完整性和纯度312.2睾丸支持细胞FasL基因表法量结果322.3淋己细胞调亡相关基因表达量结果323分析与讨论33全结36参考文献37Abstract41致谢43氣对睾丸支持细胞与淋臣細胞共培养中FasL诱导淋巧细胞淵亡的影响摘要[目的邱过染氣支持细胞和淋巴细胞体外共培养后Fas/FasL系统相关基因和蛋白表达的检测,来探讨氣对睾丸支持细胞免疫豁免的毒性机理,从而为支持细胞协助器官移植方面提供理论依据。

7、[方法]本实验设置了不同剂量氣影响下的支持细胞和淋巳细胞共培养,模拟体内睾丸曲细精管中二者的相互作用。通过MTT和TUNEL检测了淋巴细胞的相对為活率和-PCR和wes调亡率应用QRTternblot检FasLmRNA和FasL蛋白;测了染氣支持细胞内的表达变化;同时也检测了共培养后淋巳细胞内Fas蛋白的表达和Fas、caspaseS和caspase3mRNA的表达变化。[结果](1)支持细胞鉴定结果:焚光显徵備的蓝光激发下,可见支持细胞相互交一一层k织膜,胞体呈现绿乂发现支持细胞的纯度在90

8、%,都像样铺成色焚光。计数后可〇<左右活性达95/〇"上。可>义用,来建立细胞模型。(2)氣对淋巴细胞相对存活率影响MTT结果显示:随着氣化锅來度的上升,淋己-5"*细胞的相对存活率呈现下降超势,1(T^1〇、10mol/L组与对照组淋巴细胞相对存活-3mo

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